利用反相高效液相色谱RP2HPLC分离小麦胚乳醇溶-麦类作物学报.PDF

麦类作物学报 　2007 ,27 (4) :634 - 638 J ournal of Triticeae Crop s 利用反相高效液相色谱( RPHPL C) 分离小麦胚乳醇溶蛋白的研究 1 2 1 1 1 1 赵龙刚 ,李士平 ,宋希云 ,王兆华 ,张恩盈 ,徐 　坤 ( 1. 莱阳农学院生命科学学院 , 山东青岛 266 109 ; 　2 . 德州学院 , 山东德州 2530 15) 　　摘 　要 : 为了研究洗脱时间、柱温 、流速 、洗脱梯度 、蛋 白提取方法等色谱条件对反相高效液相色谱法 ( ) RPH PL C 分离小麦胚乳醇溶蛋白的影响 ,对上述条件分别进行了对比试验 。结果表明 ,利用 RPH PL C 分 离小麦胚乳醇溶蛋白的最佳实验方法为 :通过 0 . 05 mol/ L NaCl →H O →70 %乙醇三步提取醇溶蛋白,在 1. 0 2 mL/ min 的流速 、60 ℃的柱温条件下 ,对上样醇溶蛋白进行洗脱 ,洗脱梯度为流动相 B 的体积比在 55 min 内 ( ) 由2 1 %升至 48 % V/ V ,最后通过 2 10 nm 紫外光检测洗脱组分的吸收值 。重复三次的检验结果证实 ,本试 验方法稳定可靠 。 　　关键词 : 小麦 ;醇溶蛋白;反相高效液相色谱法 ( ) 　　中图分类号 :S5 12 . 1 ; S33 1 　　　　文献标识码 : A 　　　　文章编号 :1009104 1 2007 Study on Separating Wheat Gl iadin in Endosperm Cell s by Reversedphase High Perf ormance L iquid Chromatorgraphy 1 2 1 1 1 1 ZHAO Longgang ,L I Shiping , SONG Xiyun , WANG Zhaohua , ZHANG Enying , XU Kun ( 1. L aiyang Agricult ural U niver sit y ,Qingdao ,Shandong 266 109 ,China ; 2 . Dezhou Colleage , Dezhou , Shandong 2530 15 , China) Abstract : In or der to inve stigat e t he eff ect s of elution time , column t emp erat ure ,flow sp eed ,elutio n grade and p rot ein ext raction met ho d on t he sep aration of w heat gliadin in en do sp er m cell s u sin g re ver sedp ha se high p erfor mance liquid chro ma