产青霉素G酰化酶工程菌的构建.PDFVIP

年 月 甘 肃 农 业 大 学 学 报 第 卷 ２０１６ ２ ５１ 　 　 　 　 　 　 　 　 第 期 双 月 刊 １ １３２ １３７ ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＧＡＮＳＵ ＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ ～ 　 　 　 　 产青霉素 酰化酶工程菌的构建 Ｇ １ １ ２ １ ３ ， ， ， ， 邵威平 吴卓颖 张永玲 杨富民 田常庆 （ ， ； ， ； 甘肃农业大学食品科学与工程学院 甘肃兰州 临夏州人民医院 甘肃临夏 １． ７３００７０２． ７３１１００ 　 　 ， ） 甘肃农业大学生命科学技术学院 甘肃兰州 ３． ７３００７０ 　 ：【 】 （ ） 【 】 摘要 目的 构建表达巨大芽孢杆菌青霉素 酰化酶 的枯草芽孢杆菌工程菌 方法 首先采用 Ｇ ＰＧＡ ． ＰＣＲ ， 从巨大芽孢杆菌基因组ＤＮＡ 中扩增出长度为２４０９ｂ 的ＰＧＡ编码基因 经琼脂糖凝胶电泳检测及 ＤＮＡ 测序验 　 ｐ ， （ ） ， 证后 再将其与枯草芽孢杆菌穿梭表达载体 ＰＭＡ５ ７．５ｋｂ连接后导入到枯草芽孢杆菌 １０３９７中表达 并通过聚丙 （ ） 【 】 ， 烯酰胺琼脂糖凝胶电泳 检验其能否表达 结果 构建了 大小的 重组质粒 经 ＳＤＳＰＡＧＥ ． ９．９ｋｂ ＰＭＡ５ＰＧＡ － － ， 、 ／ 验证 青霉素酶基因在枯草芽孢杆菌 中作出表达 基