氮源对LΟ苏氨酸发酵的影响-中国科技论文在线.PDF

中国生物工程杂志 　Ch ina B iotechno logy, 2006, 26 ( 11) : 54 ～58 氮源对 L 苏氨酸发酵的影响 1 2 1 1, 3 1 冯志彬 　王东阳 　徐庆阳 　温廷益 陈　宁 ( 1天津科技大学天津市工业微生物重点实验室 　天津 　300222) (2 山东鄄城菱花味精股份公司　鄄城 　272000　3 中国科学院微生物研究所 　北京 　100080) 摘要 　以 L 苏氨酸生产菌 TRFC为供试菌株 ,研究了氮源对 L 苏氨酸发酵的产量和糖酸转化率 的影响 。首先通过摇瓶实验确定发酵的最佳无机氮源和有机氮源分别为硫酸铵和酵母粉 ,进一 步利用 10L 罐补料分批发酵确定硫酸铵和酵母粉的最佳用量 ,继续优化培养条件 ,采用发酵中后 期流加硫酸铵和糖氨混合补料等措施 , L 苏氨酸产量得到进一步的提高 。在最优发酵条件下 ,通 过 10L 罐补料分批发酵 36h ,产酸可达 118. 9g /L ,糖酸转化率为 47. 6% 。 关键词 　L 苏氨酸 　氮源 　补料分批发酵 中图分类号 　TQ922 　　L 苏氨酸是人与动物体内所必需的一种氨基酸 ,具 1. 3　培养方法 有恢复人体疲劳 , 促进生长发育的效果 , 自身不能合 　　种子培养 : 吸取适量无菌生理盐水于 1支活化斜 成 ,必须从食物中摄取 。在人和动物所需的八种限制 面中,将所有菌悬液全部接入 5L 种子罐中,搅拌转速 性氨基酸中,苏氨酸是仅次于蛋氨酸 、赖氨酸 、色氨酸 300 ～700 r /m in ,维持 pH 7. 0 ,培养温度 37 ℃。 的第四种氨基酸 。在大多数植物蛋 白饲料中, 苏氨酸 　　10L 罐发酵 :按 1%接种量将种子液接入 10L 发酵 是第二或第三限制性氨基酸 ,是重要的营养强化剂 [ 1 ] 。 罐中;搅拌转速 500 ～800 r /m in; 维持 pH 7. 0 , 培养温 提高 L 苏氨酸的产率和糖酸转化率可 以节约生产成 度 37 ℃; 以泡敌消泡 ;发酵到一定时间流加补料液 。发 本 ,促进 L 苏氨酸 的产业化生产 。Song 等 [ 2 ] 和 L ee 酵过程中每隔一定时间取样进行各项参数测定 。 等 [ 3 ]研究发现优化培养基和培养条件可以有效提高 L 1. 4　分析方法 苏氨酸的产量 。氮源主要用于构成菌体细胞和含氮 目 1. 4. 1　菌体生长 　将菌液稀释一定倍数 , 以去离子水 的产物 ,其中无机氮源是微生物生长的速效氮源 ,有机 蒸馏水作为空白对照 ,采用分光光度计于 1cm 光程测 氮源为菌体生长提供氮元素和必需的生长因子 ,对培 定 OD600 。 养基的优化意义重大 [4 ] 。本文对如何进行 L 苏氨酸发 1. 4. 2　还原糖 　采用 3 , 5 二硝基水杨酸法 。 酵的优化控制 、有 目的地控制基质中的氮源消耗 ,使之 1. 4. 3　L 苏氨酸含量 　采用 E lite AAA 氨基酸分析系 更多地转化为 目标产物进行了研究 。 统测定 。 1　材料与方法 2　结 　果 1. 1　菌 　种 2. 1　不同有机氮源对 L 苏氨酸发酵的影响 　　L 苏氨酸生产菌 TRFC,天津科技大学代谢控制发 　　分别选取酵母粉 、黄豆干粉 、玉米干粉 、蛋 白胨作 酵研究室保藏菌株 。 为 L 苏氨酸发酵的初始有机氮源 ,添加量为