细胞生物学第4版第三章.pdf

-EEEE 细胞生物学研究万法 同生物学其他分支学科一样，技术的进步在细 胞生物学的建立与发展中起着巨大的作用。没有显微 镜的发明就不会有细胞的发现，也就不可能提出细胞 学说;同样，如果没有电子显微镜技术的建立及其与 第一节细胞形态结梅的观察方法| 分子生物学技术的相互结合，也难以想象细胞生物学 会有今天这样的长足进展。那么，究竟哪些技术属于 细胞生物学研究方怯的范畴呢? 一般来说，凡是用来 肉眼的分辨率一般只有 0.2mm，很难识别单个细 解决细胞生物学问题所采用的方也都应属于细胞生物 胞;光学显微镜的分辨率能力达到 0.2 μm ，借此发现了 学研究方怯。然而，随着学科的交叉与融合，当今几 细胞;电子显微镜分辨率高达 0.2 nm ，将细胞的超微 乎没有哪些生物学问题与细胞和细胞生物学无关。虽 结构展现在人们面前。图 3 一 l 比较了光学显微镜、电 然对生物大分子结构与功能的分析是了解细胞结构与 子显微镜和扫描隧道显微镜适直观察的样品大小及分辨 细胞生命活动的基础，在目前细胞生物学研究中也常 率。有趣的是，光学显微镜、电子显微镜和扫描隧道显 常使用这些实验方告与技术，如基因的克隆、表达与 微镜，除了它们因提高分辨率而称之为显微镜这一共性 DNA 序列测定，研究特异DNA、 RNA 片段或蛋白质 外，在其成像原理、仪器构造以及使用和操作方住等方 所常用的 Southern 杂交、 Northern 杂交和蛋白免疫印 面，几乎没有任何共同之处。 迹技术等。但这些技术在生物化学、分子生物学和遗 传学等学科中己有介绍，本教材不再过多重复。着眼 一、 光学显微镜 于细胞生物学的学科特点、发展历史及当前所研究的 内容，本章拟从细胞形态的结构观察、细胞及其组分 17 世纪，光学显微镜 (light microscope) 的发明使 的分析、细胞培养与生物工程、细胞及生物大分子的 人们第一次看见了细胞，进而建立了细胞学说，为细胞 动态变化等几个方面介绍有关细胞生物学研究方毡， 学的兴起和发展打下基础。光学显微镜至今仍然是细胞 侧重于实验方佳的基本原理及所能解决的问题。具体 生物学研究的重要工具。随着光学显微术与图像技术的 的操作步骤详见相关参考书。 快速发展，光学显微镜在研究细胞的结构与功能，特别 是生物大分子在活细胞中的定位及其动态变化和相互作 用等方面展示出了新的活力。 30 1cm 1 mm 100μm 10μmμm 100nm 锦 辩理… | 光学显微镜 ! | 电子显微镜 l 卡一一一一一 扫描隧道显微镜一一一一一→| 图 3-1 几种显微镜可观察的样目大小(箭头之间的范围)及具分辨能力(右侧箭头所指位置) 所以普通光学显微镜的最大分辨率是 0.2μm。 (一)普通复式光学显微镜