不同冻存条件对甘蔗原生质体活力和再生能力的影响-中国生物工程预.PDF

不同冻存条件对甘蔗原生质体活力和再生能力的影响1 李素丽，宋亚妮，李志刚*，刘芳君，赖沛衡，覃潇怡，李嘉俊 （广西大学 农学院，南宁，530005 ） 摘 要：为了获得活力高和再生能力强的甘蔗原生质体，本研究对甘蔗原生质体的冻存液浓度、冻存温度 和冻存部位进行研究，结果发现： （1）不同的冻存液、不同的冻存温度和不同的取材部位原生质体冻存后 复苏对甘蔗原生质体的活力影响有显著差异性，三个冻存液组合比较，在组合2 （70%培养基+20%血清+10% DMSO ），冻存30 d 后复苏活力最强，高达72%；冻存90 d 内复苏，-196℃液氮和-80℃冰箱冻存，甘蔗原 生质体的活力差异不显著，活力均达75% 以上，但90 d 冻存后复苏，-196℃液氮冻存后复苏比-80 ℃冰箱 冻存冻存后复苏原生质活力强；不同取材部位比较，幼叶冻存30 d 后复苏所得原生质体活力较高达79.2%， 茎尖冻存30 d 后复苏所得原生质体活力仅为42.7% ；（2 ）不同的冻存液和不同的冻存温度，细胞第一次启 动分裂和形成细胞团的时间差异不显著，一般培养5~6 d ，细胞壁基本形成完整，培养6 d 后，细胞启动分 裂，培养15 d 后形成细胞团。不同的材料部位相比较，茎尖酶解所得原生质体再生能力最强，较幼叶酶解 原生质体，形成细胞壁的时间早3 d ，第一次分裂时间早2 d 。研究结果将为甘蔗原生质体的超低温保存提 供科学依据，为体细胞融合育种、遗传学和转基因研究提供材料和技术支撑。 1 v 关键词: 甘蔗， 原生质体，冻存，活力，再生 9 DOI ：10.11931/guihaia.gxzw201802023 4 2 0 0 Effects of different freezing conditions on the vitality and . 6 0 regeneration ability of sugarcane protoplast 8 1 LI Suli, SONG Yani, LI Zhigang,LIU Fangjun,LAI Peiheng,QIN Xiaoyi,LI Jiajun 0 (Agriculture college, Guangxi University , Nanning , 530005, China) 2 : v i X Abstract: In order to obtain high vitality and regeneration ability of sugarcane protoplast, this a n experiment was done to study the protoplast of frozen storage liquid combination, frozen storage i temperature, frozen storage time and recovery temperature. The results showed that: （1） h c Different cryopreservation, different cryopreservation temperature and different sources of protoplast of different materials have significant difference on the