酒精法去上皮对角膜上皮紧密连接影响的研究-眼科学专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 1 英文缩略词表 英文缩写 英文全称 中文全称 PRK Photorefractive keratectomy 准分子激光角膜表面切削术 LASIK Laser in situ keratomileusis 准分子激光原位角膜磨镶术 LASEK laser-assisted subepithelial keratomileusis 准分子激光原位角膜磨镶术 Epi-LASIK Epipoilis laser in situ keratomileusis 机械法准分子激光角膜上皮瓣 下磨镶术 h hour 小时 Fig figure 图 Tab table 表 n number 样本数量 P Probability 概率 PBS Phosphate buffer solution 磷酸盐缓冲液 SPSS Statistical package for the social science 社会科学统计软件包 酒精法去上皮对角膜上皮紧密连接影响的研究 摘 要 目的：探讨屈光手术中酒精法去上皮对大鼠角膜上皮紧密连接的影响。 方法：60 只 SD 大鼠随机分为酒精组和机械组，各 30 只。在各组内再将大鼠随机 六组（A、B、C、D、E、F），每组 5 只，每只大鼠随机选择一只眼作为手术眼， 另一只眼作为对照眼。分别用来观察 24 h 大鼠角膜上皮缺损直径、检测 24、48、 72、96、120 h 角膜上皮 claudin-1、ZO-1 蛋白的表达情况。心脏注药法处死动物， 取眼球，用 OCT 冰冻包埋，制作冰冻切片，HE 染色，免疫荧光法检测角膜上皮 紧密连接蛋白表达光密度，进行统计学比较。 结果： 1. 去上皮时间：酒精组和机械组去上皮时间的差异有统计学意义（P0.05）。 2. 角膜上皮中央缺损直径：24 h 手术显微镜下观察 60 只大鼠的手术眼，中央区角 膜上皮均有缺损。裂隙灯照相分析酒精组和机械组 A 组大鼠术眼角膜上皮缺损 直径的大小，酒精组和机械组角膜上皮缺损直径差异无统计学意义。手术显微 镜下观察 48 h 实验大鼠手术眼角膜上皮光滑，均未见缺损。 3．组织病理学改变：HE 染色结果显示两组 48 h 移行的角膜上皮完全覆盖损伤的 部位，但仅 2～3 层上皮细胞，细胞形态异常，变大、扁平延长。96 h 角膜上 皮基本恢复正常形态。 4. ZO-1 蛋白表达差异：ZO-1 主要在角膜上皮表层细胞表达，24、48 h 酒精组和 机械组角膜上皮 ZO-1 蛋白的表达差异有统计学意义(P0.05)。72、96、120 h ZO-1 蛋白的表达在酒精组和机械组差异无统计学意义。 5. claudin-1 蛋白表达差异：claudin-1 主要在角膜上皮翼状细胞和基底细胞层表达， 24、48 h 酒精组和机械组角膜上皮 claudin-1 蛋白的表达差异有统计学意义 (P0.05)。72、96、120 h claudin-1 蛋白的表达在酒精组和机械组差异无统计学 意义。 结论：屈光手术手术中酒精法去上皮较机械法去上皮速度快，二者角膜上皮再生 时间未见明显区别。但酒精法去上皮较机械法影响角膜上皮紧密连接的修复，说 明 20%酒精去上皮影响角膜上皮的修复。 关键词：准分子激光角膜切削术 酒精 大鼠 角膜上皮 紧密连接 The Expression of Tight Junction Protain in Corneal Epithelium after De-epithelialization with Alcohol Abstract Objectives To investigate the expression of tight junction protein in corneal epithelium after chemical de-epithelialization with 20% ethanol solution in refraction operation. Methods Sixty Sprague-Dawley rats were randomly divided into two equal groups, ethanol group and mechanical group, each has 30 rats. In each group, the 30 rats were were randomly divided into six subgroups(named A、B、C、D、E、F), each has five ones. One eye of each rat was treated with de-epithelialization operation