动物细胞工程主体医学课件.ppt

　　在体细胞克隆羊“多莉”培育成功之前，胚胎细胞核移植技术已经有了很大的发展。实际上，“多莉”的克隆在核移植技术上沿袭了胚胎细胞核移植的全部过程，但这并不能减低“多莉”的重大意义，因为它是世界上第一例经体细胞核移植出生的动物，是克隆技术领域研究的巨大突破。这一巨大进展意味着：在理论上证明了，同植物细胞一样，分化了的动物细胞核也具有全能性． 4.动物克隆实例很多，为何多莉就举世闻名呢？ * 2.体细胞核移植技术的应用前景 * 你还在为身体有残疾而苦恼吗？你还在为器官移植找不到合适的供体而焦虑吗？不能在这样下去了，看看我们的体细胞核移植技术吧，只需要从你身上取一个小小的体细胞，通过核移植培养出胚胎干细胞，再用胚胎干细胞诱导分化出各种组织器官，这样的器官的组织相容性抗原跟你的一摸一样，用这样的器官进行器官移植，根本就不会发生免疫排斥。不夸张的说，如果这项技术研究成熟了，以后大家换条胳膊换条腿就跟给汽车换个轮胎一样。你听明白了吗？这不是天方夜谭，巨大的前景就在眼前，你还在等什么？现在，对，就是现在，赶紧加入到生命科学的研究中来吧！ 广而告之： * 二、动物细胞融合 * 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 灭活：是指用物理或化学手段使病毒失去感染细胞的能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。 * 二、动物细胞融合 概念： 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 结果： 形成单核的杂交细胞 原理： 细胞膜的流动性 诱导方法： 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒 * 注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞。 意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 * 三、单克隆抗体 长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。 1、传统抗体的获得方法 在动物发生免疫反应的过程中，体内的多种B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。 2、一个美丽的发现 * 3、一个大胆的猜想 将能够产生特定抗体的B淋巴细胞和具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞融合在一起，形成杂交瘤细胞。 * 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 融合 专一抗体检验阳性 选择性培养基筛选 克隆化 单克隆抗体 专一抗体检验阳性 用有限稀释法进行单克隆，再专一抗体检验阳性 克隆化 * * 5、单克隆抗体的概念： 由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞群，产生的化学性质单一、特异性强的抗体。 6、单克隆抗体的优点： 特异性强、灵敏度高、产量大 * 四、单克隆抗体的应用 1、诊断试剂 2、运载药物—“生物导弹” 准确、高效、简易、快速 * 抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体 在受精后不久，胎盘滋养层细胞就会分泌人绒毛膜促性腺激素(HCG)，是由受孕妇女体内胎盘产生的一种糖蛋白类激素，在孕妇的尿液中大量存在。而在非妊娠妇女尿液中几乎不含有。 * 早孕试纸其实是利用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做为配体，固定在层析柱上，以胶体金为指示标记，检测尿液中的HCG浓度，来确诊妇女是否怀孕。 阳性：出现两条红色条带。一条位于对照区C,另一条位于检测区T，表示已怀孕。 阴性：仅在对照区C出现一条红色条带，在检测区T无红色条带出现，表示未怀孕。 无效：5分钟在对照区C无红色条带出现，则测试失败或试纸已失效。 * 甲胎蛋白（AFP）是一种特异性较强的肿瘤标志物，用甲胎蛋白作为抗原免疫小鼠，制备抗AFP单克隆抗体，并与含有放射性同位素的标记物连接，单克隆抗体携带放射性标记物通过全身血液渗透到所有组织。由于肿瘤细胞表面的AFP会和单克隆抗体特异性的结合，所以放射性同位素标记物就不断积累在肿瘤上。通过一定的显影技术就可以发现肿瘤所在。 * 生物导弹”： 用癌细胞作为抗原，免疫小鼠，制备抗癌细胞单克隆抗体，并与抗癌药物连接，便制成了生物导弹，注入患者体内，借助单克隆抗体的导向作用，将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞。这样既不损伤正常细胞，又减少了药剂的用量。 * 1．(2009年浙江理综)用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是(　　) A．都需用CO2培养箱 B．都需用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行 D．都可体