干式生化膜片的制备及其应用-应用化学.PDF

第３２卷 第８期 应 用 化 学 Ｖｏｌ．３２Ｉｓｓ．８ ２０１５年８月 　　　　　　　ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＡＰＰＬＩＥＤＣＨＥＭＩＳＴＲＹ　　　　　　　 Ａｕｇ．２０１５ 干式生化膜片的制备及其应用 杨惠宇　张　昊　徐美玲　干高龙　陈克乐　于源华 （长春理工大学生命科学与技术学院　长春 １３００２２） 摘　要　建立了一种快速检测血液中二氧化碳结合力（ＣＯＣＰ）、葡萄糖（ＧＬＵ）、尿酸（ＵＡ）含量的干式生化 ２ 分析方法。筛选出合适的膜材料作为干片载体，制备干片，用干式生化分析仪检测干片，建立了测定血液中 ＣＯＣＰ、ＧＬＵ、ＵＡ含量的标准曲线，对所建立的方法进行加标回收实验、稳定性实验、批间、批内重复性实验、 ２ 方法学比较。此法制备的干片颜色梯度明显、显色均匀，测定ＣＯＣＰ、ＧＬＵ、ＵＡ的线性范围较宽；批间与批内 ２ 变异系数均小于５％，重复性良好；与临床湿化学检测相比具有良好的相关性，相关系数大于０９９，可应用于 临床检测。 关键词　干化学；干片；临床检测；干式生化分析方法 中图分类号：Ｏ６５２；Ｒ４４６　　　　　文献标识码：Ａ　　　　　文章编号：１００００５１８（２０１５）０８０９６３０６ ＤＯＩ：１０．１１９４４／ｊ．ｉｓｓｎ．１００００５１８．２０１５．０８．１４０３５８ ［１４］ ［５］ 目前，干化学 检测技术是现场快速检测 的主要支撑技术，在检验医学中有广阔的应用空间， ［６７］ 已作为常规方法在临床检验 中广泛应用。早在 １６世纪人们已经使用石蕊试纸检测液体的酸碱性， 这是干化学法的最早应用，１８世纪初，英国化学家Ｗｉｌｌｉａｍｐｒｏｕｔ使用干式化的试剂检测尿液的ｐＨ值，这 是干化学试剂在生物体液检测中的最早应用。本文制备的干片为基于反射光度法干片，采用高分子膜 材料为试剂载体，通过吸附试剂来制备干片，与传统的湿化学检验方法相比具有操作简单、试剂易保存、 检测速度快等优点，数分钟即可检测并报告结果，故适用于急诊标本检测等领域，有取代湿化学法检测 的可能性。现在市场上生产干化学分析系统的厂家主要有日本京都爱克来、富士、瑞士罗氏和美国强 生。其中市场份额占有最大的是强生，而国内除比较简单的干化学尿液试纸和分析仪外，还没有更多的 干化学仪器［９１０］和试剂载体产品出现，多数依赖进口。 ［１１］ 为解决上述问题，本文研究了检测一系列指标的多层膜 生化干片的制备方法，如葡萄糖（ＧＬＵ）、 尿酸（ＵＡ）、二氧化碳结合力（ＣＯＣＰ）３种试剂干片，建立了一种快速检测血液中葡萄糖、尿酸、二氧化 ２ 碳结合力的干式生化检验方法。为干化学分析技术在国内的推广和应用提供方法和技术基础。 １　实验部分 １．１　仪器和试剂 干式生化分析仪（利用反射光原理自制的全光谱仪器）、日立７１８０型全自动生化分析仪（日本日立 公司）；ＨＰＸ９１６２ＭＢＥ型电热恒温培养箱（上海博迅实业有限公司医疗设备厂）；ＳＰＨ２１１Ｂ型恒温培 养摇床（上海世平实验设备有限公司）；ＤＦ１型集热式磁力搅拌器（江苏金坛市金城国胜实验仪器厂）； ＭＸＦ型旋涡混合器（美国ＳＣＩＬＯＧＥＸ公司）；ＦＹＹ２５００１ＲＯ型基础应用型纯水机（青岛富勒姆科技有 限公司）；ＣＯＣＰ、ＧＬＵ、ＵＡ测定试剂盒均购于长春汇力生物技术有限公司；膜材料Ｇｒａｄｅ１７Ｃｈｒ（层析 ２ Ｇｒａｄｅ４０、Ｇｒａｄｅ２（ｗｈａｔｍａｎ公司）、膜材料Ｎ６、ＮＬＢ０４５（海宁市正大过滤设备有限公司）、膜材料 滤纸）、 ＮＬＷ１００、ＮＬＷ８０、ＳＳＷＰ（美国密理博（ＭＩＬＬＩＰＯＲＥ）公司）；标准血清。 １．２　实验方法 １．２．１　高分子膜材料的筛选　通过对膜材料的载水量、通透性、流体扩散速