临床微生物学概论.pptVIP

临 床 微 生 物 学 概 论 复旦大学附属华山医院抗生素研究所 朱德妹 教授 主要内容 临床微生物学概论 细菌的耐药性及耐药机制 主要细菌的耐药性变迁及实验室诊断 细菌耐药性监测 细菌耐药性的防治 临床常见的致病菌 G（＋）： 金葡菌，表葡菌，α-链球菌，β-溶链（A、B组），肺链，肠球菌 G（－）： 需氧球菌： 脑膜炎和淋病奈瑟球菌，卡他莫拉菌 需氧杆菌： 不动，假单胞，粪产碱杆菌 需氧和兼性厌氧：肠杆菌科细菌，如大肠杆菌，肺 克，伤寒，志贺菌 厌氧细菌： 消化链球菌，脆弱拟杆菌等 二.细菌耐药性及耐药机制 简述抗菌药物的作用机制 细菌对抗菌药物的耐药机制 细菌耐药性的遗传学基础 （一）抗菌药物的作用机制 干扰细菌细胞壁的合成，使细菌不能生长繁殖。 损伤细菌的细胞膜，破坏其屏障作用。 影响细菌细胞蛋白质的合成，使细菌丧失生 长繁殖的物质基础。 破坏核酸的代谢，阻碍遗传信息的复制。 抑制细菌叶酸代谢等。 抗菌药物的主要作用靶位 （二）细菌主要的耐药机制 灭活酶与钝化酶的产生 抗生素渗透屏障作用 靶位结构改变 细菌代谢状态，营养缺陷等 细菌菌膜形成 耐药机制 1.灭活酶和钝化酶的产生 β－内酰胺酶 氨基糖苷类钝化酶 氯霉素酰基转移酶 MLS类抗生素钝化酶（Macrolide-Licosamide Streptogramin） ?-内酰胺酶分类 底物谱 青霉素酶 头孢菌素酶 广谱酶：青霉素类、一、二代头孢菌素 超广谱酶：三、四代头孢菌素、碳青霉烯类 遗传学基础 质粒酶、染色体酶 可诱导性 体质酶（固有的）、诱导酶 ?-内酰胺酶分类 ?-内酰胺酶分类 ESBLs分类 氨基糖苷饨化酶 氨基环醇环和多个氨基糖分子，由配糖键相连接 氨基糖苷饨化酶可以对氨基糖分子的活性基团进行修饰而使之失去抗菌活性 不同的氨基糖苷饨化酶可饨化同一种氨基糖苷类；而同一种氨基糖苷饨化酶可饨化不同的氨基糖苷类 氨基糖苷类药物结构 氨基糖苷类钝化酶 乙酰转移酶 AAC（2’） AAC（6’） AAC（3） 核苷转移酶 ANT（4’） ANT（3’） ANT（2’） ANT（6’） 磷酸转移酶 APH（3’ ） APH（3”） APH（5”） 革兰阳性菌 （双重功能酶） AAC（6’）+APH（2’’） 耐药机制 2.抗生素渗透障碍：细胞壁障碍或细胞膜通透性的改变，抗生素无法进入细胞内达到作用靶位而发挥作用。 细胞壁：类脂双层，脂多糖（LPS），阻碍疏水性抗菌药物进入菌体。 细胞外膜：OmpF，OmpA，OmpC孔蛋白丢失或减少，阻碍亲水性抗菌药物进入菌体。 细胞内膜（胞浆膜）：产生新的能量依赖性转运系统。MexA-MexB-OprM。 耐药机制 3.靶位结构改变 靶位酶：二氢叶酸合成酶 靶位生理功能：细菌形态和活力 靶位结构：MRSA的PBP2′，DNA旋转酶 耐药机制 4.其他 细菌代谢状态的改变：对氨苯甲酸产量（PABA） 营养缺陷、L型细菌（无细胞壁） 细菌菌膜的形成 抗菌药物不能透过整个菌膜 菌膜对抗菌药物的敏感性降低 菌膜内的细菌具有独特的生物学特征 4种主要耐药机制 主要耐药机制 （三）细菌耐药性的遗传学基础 染色体介导耐药 质粒介导的耐药 1.染色体介导的耐药性 耐药基因位于染色体，随细菌分裂传至后代 突变频率低：10－5～10－9 通常只对1，2种类似药物耐药 产生或消失和药物存在无关 耐药菌生长分裂变慢，竞争力变弱 居次要地位 2.质粒介导的耐药性 染色体外的DNA 耐药质粒：R.plasmid 类型： 接合型（Conjugative plasmid） 耐药决定因子＋耐药转移因子 非接合型（Nonconjugative plasmid） 耐药决定因子 转移方式： 接合型： 接合转移 非接合型：转化，转导等方式 耐药基因的转移方式 转化 Transformation 转导 Transduction 接合 Conjugation 转座 Transposition 接合（Conjugation） 方式：通过耐药菌性菌毛和敏感菌菌体 的直接沟通，由耐药菌将耐药质粒边复制边转移给敏感菌。 细菌：革兰阴性菌，特别是肠道细菌。 发生频率：10－2～10－8 临床意义：可造成耐药菌的爆发流行， 种间，属间，牲畜与人 细菌耐药性 细菌 细菌对抗菌药物耐药的生物学表型 既可以通过突变成为细菌的特征传给子代,又可以接受或转移耐药基因,导致耐药基因扩散 耐药基因可编码多种耐药机制来抵制抗