纤维素水解液厌氧发酵产丁二酸发酵液中有机酸和混合单糖的测定.PDF

第 37卷 分析化学 ( FENX I HUAXU E) 　研究简报 第 4 期 　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　 2009年 4 月 Ch ine se Jou rnal of A nalytical Chem istry 605 ～608 纤维素水解液厌氧发酵产丁二酸发酵液中 有机酸和混合单糖的测定 姜 岷 　雷 丹 　陈可泉 　李 建 　姚嘉 　　韦 萍 (南京工业大学制药与生命科学学院 ,材料化学工程国家重点实验室 ,南京 2 10009) ( ) 摘 　要 　对于以纤维素类原料 玉米皮 水解糖液作碳源厌氧发酵制备丁二酸的发酵液 ,利用 Am inex HPX ( μ ) ( 87H 300 mm ×78 mm i. d. , 5 m 离子排斥色谱柱及折光示差检测器检测 , 以 0005 mo l/L H2 SO4 溶液 pH ) 2 0 作流动相 ,在流速为 06 mL /m in,柱温为 55 ℃时对发酵液进行检测 , 16 m in 内能将发酵液中甲酸 、乙酸、 丁二酸 、葡萄糖 、木糖 、阿拉伯糖完全分离定量 。6种物质线性相关系数均大于 0999,方法的回收率为 993% ～ 1021% ; R SD 为 06% ～16% 。本方法能够简便 、快速测定丁二酸发酵体系中有机酸及单糖的含量 。 关键词 　高效液相色谱 ,玉米皮水解液 ,丁二酸发酵液 ,有机酸 ,混合单糖 1　引　言 自 199 1年 Doyon 等 [ 1 ] 首次报道了用 HPLC在同一条件下同时检测有机酸和糖的混合标准溶液后 , 关于高效液相色谱法同时检测糖及有机酸的报道越来越多[ 2 ～10 ] 。有机酸发酵过程中底物和有机酸产 物同时检测对于发酵过程监控具有指导意义 。钱兵等 [ 8 ] 以反相高效液相色谱法测定丙酸发酵液中有 机酸 ; 白冬梅等 [ 9 ] 利用 Eclip se XDB2C 柱同时检测琥珀酸发酵液中的有机酸和葡萄糖 ;刘宇鹏等 [ 10 ] 利 8 用 Am inex HPX87H 离子排斥色谱柱同时检测琥珀酸发酵液中的葡萄糖 、有机酸及乙醇 ,但所检测的发 ( ) 酵液都只利用单一底物 葡萄糖 作为发酵碳源 。当前利用木质纤维素资源制备生物基化学品已成为 一种必然的趋势 。木质纤维素的水解液成分复杂 ,若能采用 H PLC 同时检测发酵体系中混合糖及代谢 产物 ,对于考察木质纤维素水解液的利用情况以及菌株代谢过程具有积极的意义 。 ( ) 丁二酸 又称琥珀酸 作为重要的 C 平台化合物 ,被美国能源部认为是未来 12 种最具前景的生物 4 炼制产品之一 [ 11 ] 。目前利用木质纤维素资源生产丁二酸可有效降低生产成本 ,本课题组以玉米皮水解 ( ) ( ) 液作为生产琥珀酸放线杆菌培养的碳源 ,其中含有六碳糖 葡萄糖 和五碳糖 木糖和阿拉伯糖 以及少