标准名称-安徽食品行业协会.DOCVIP

T/AHFIA FORMTEXT安徽省食品行业协会团体标准 T/AHFIA 004—2018 FORMTEXT????? 食品中总皂苷含量的测定 分光光度法 Determination of total saponins in Food Spectrophotometric method 2019 - 01 - 15实施 FORMTEXT??安徽省食品行业协会??????发布 2018 - 12 - 26发布 T/AHFIA 004—2018 PAGE \* MERGEFORMAT 1 前??言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由安徽省食品行业协会提出并归口。 本标准起草单位：安徽瑞思威尔科技有限公司、安徽古井贡酒股份有限公司、安徽润安信科检测科技有限公司。 本标准主要起草人：李安军、王录、刘国英、陆玮、芮君君、刘智慧、何宏魁、杨恩贺。 T/AHFIA 004—2018 PAGE \* MERGEFORMAT 1 食品中总皂苷含量的测定 分光光度法 1 范围 本标准规定了食品中总皂苷含量的测定 分光光度法。 本标准适用于食品中总皂苷含量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 方法原理 本标准采用香草醛高氯酸分光光度法测定总皂苷含量。皂苷在强氧化性酸的作用下脱氢，再与香草醛加成显色，形成特征的紫红色化合物。在一定浓度范围内，吸光度与皂苷类化合物的含量成正比，符合朗伯-比尔定律。 4 试剂与材料 4.1 试剂 4.1.1 无水乙醇：分析纯。 4.1.2 香草醛：分析纯。 4.1.3 冰醋酸：分析纯。 4.1.4 高氯酸：分析纯。 4.1.5 XAD-2大孔树脂：纯度≥98%。 4.1.6 无水氧化铝：分析纯。 4.1.7 水为符合 GB/T 6682 规定的一级水。 4.2 试剂配制 4.2.1 香草醛冰醋酸溶液（5%）：精确称取5 g（精确至0.0001 g）香草醛，用冰醋酸溶解定容至100 mL。 4.2.2 乙醇溶液（70%）：量取700 mL无水乙醇，用水溶解定容至1000 mL。 4.3 标准品 人参皂苷（Re，CAS号：52286-59-6），纯度≥ 99.0%。 4.4 人参皂苷Re标准溶液配制 准确称取20 mg（精确至0.1 mg）Re标准品，用70%乙醇溶解定容至50 mL，此溶液中人参皂苷含量为400 mg/L。于4℃冰箱中避光保存。 5 仪器与设备 5.1 紫外可见分光光度计：配1 cm比色皿。 5.2 分析天平：感量0.1 mg。 5.3 电热恒温水浴锅：0℃~100℃。 5.4 玻璃层析柱：10 mm*40 cm（内径*长度）。 6 分析步骤 6.1 试样制备 6.1.1 固体试样 称取粉碎均匀的固体试样5 g（精确至0.0001 g）于100 mL烧杯中，加入30 mL70%乙醇溶液，超声30min，用70%乙醇溶液定容至50 mL容量瓶。离心至澄清，过滤备用。 6.1.2 液体试样 精确吸取5.0 mL液体试样于50 mL容量瓶中，用70%乙醇溶液定容，摇匀，备用。当稀释后的试样基质较复杂时，需过滤至澄清液备用。 6.2 样品提取 6.2.1 层析柱的预处理 取适量树脂于烧杯中，使用无水乙醇浸泡至覆盖树脂2.5 cm~5 cm，缓慢搅拌树脂1min以充分混合，静置2 h。倒出乙醇，用蒸馏水冲洗，直至无醇味。然后再用等量的无水乙醇洗涤，充分混合静置20min，再用蒸馏水洗至无醇味。对活化后的树脂进行分装，每份树脂质量为5 g，备用。 6.2.2 样品纯化 精确吸取2.0 mL制备的试样加入5 g（精确至0.0001 g）活化后的树脂中，摇匀，静置30min。将加样后的树脂移入层析柱中，上加2 g（精确至0.0001 g）无水氧化铝，用30 mL水洗柱，弃去洗脱液，再用30 mL70%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液于蒸发皿中，于60℃水浴挥干。 6.3 测定 6.3.1 仪器条件 6.3.1.1 测定波长：545 nm。 6.3.1.2 比色皿：1 cm。 6.3.2 标准曲线的制作 准确吸取人参皂苷标准溶液（4.4）0.0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6 mL分别置于蒸发皿中，于60℃水浴挥干，加入0.4 mL5%香草醛冰醋酸溶液（4.2.1），转动蒸发皿，使残渣溶解，再加入1.6 mL高氯酸（4.1.4），混匀后移入10 mL比色管中，70℃水浴上加热20min，取出，冰浴冷却2min，准确加入5.0 mL冰醋酸（4.1.3），摇匀后