食品中外源化学毒物的生殖毒性.PPTVIP

Company Logo 第三节 致畸试验 致畸物：能引起妊娠的人或试验动物产生畸胎的外源化学物称为致畸物。 动物致畸试验 体外致畸作用试验法 Company Logo 动物致畸试验 动物致畸试验：检查受试外源化学物能否通过妊娠母体引起胚胎毒性或后代畸形的动物试验。 原理：胚胎在器官形成期，可因受到化学物或放射性物质的作用，使细胞分化、器官形成和正常发育受到阻滞，以致出现胎仔器官的器质性缺陷而呈现畸形，从而通过观察妊娠母体在敏感期接触受试物后胚胎及胎仔的发育状况来评价某种外源化学物有无致畸作用。 Company Logo 动物致畸试验：基本方法 （1）动物选择 原则：（1）一般动物实验的遵循原则 （2）妊娠期较短而一致、产仔数多和胎盘结构和人类接近且自发率较低。 一般选用两种哺乳动物，首选大鼠，此外可采用小鼠或家兔。 首选大鼠的原因：1.代谢过程基本与人类接近； 2.大鼠受孕率较高，产仔数多； 3.胎仔大小适中，易观察畸形情况； 缺点：1.代谢快，易感性较低，易出现假阴性结果； 2.胎盘结构与人类有一定差异 Company Logo （2）交配处理 选健康性成熟的雌雄动物，按雌雄1：1或2：1同笼交配，次日早晨阴道涂片检查精子或检查阴栓，凡发现检出精子或阴栓，即确定为妊娠第0天。将检出的孕鼠随机分组。 （3）染毒方式及时间 动物致畸试验：基本方法 一般多采用经口给予，雌鼠妊娠的第7~15天染毒，试验期间每2~3天称取孕鼠体重。 Company Logo （4）剂量分组 至少三个剂量组 高剂量组:引起母体轻度中毒，即进食少，体重减轻，死亡不超过10%，1/5~1/3LD50 中剂量组（阈剂量）：允许出现某些较低的中毒症状。 低剂量组:不应观察到任何中毒症状，1/50~1/30LD50（最大无作用剂量） 阳性对照组：维生素A、乙酰水杨酸、敌枯双、五氯酚钠等 阴性对照组 Company Logo （5）动物剖检 鼠类有食畸形胎仔的习性，应在预期分娩前1~2天处死母鼠进行检查。一般大鼠在受孕后第19~20天，小鼠第18~19天。暴露子宫和卵巢，为胎仔检查作准备。 Company Logo （6）胎仔检查 切开子宫，并记录每窝胎仔中活胎数、晚期死胎数、早期死胎数、吸收胎数及各种胎仔的特征，并记录编号。对活仔要测量其体重、体长、尾长和性别（生殖突与肛门间距离）。对大鼠还应取出卵巢、记录黄体数。黄体呈黄色，突起于卵巢表面，呈鱼卵状，可代表排卵数。 活产胎仔畸形检查 外观畸形检查 内脏及软组织畸形检查 骨骼畸形检查 需在鲍音氏溶液中固定2周以上，用自来水冲洗固定液后，切片检查。 需经固定、透明和茜素弘染色等步骤， Company Logo （7）结果判定方法 平均着床数（%）= 怀孕母鼠数 交配母鼠数 Χ100% 平均活胎率（%）= 活产胎的总数 怀孕母鼠数 Χ100% 着床后死亡率（%）= 吸收胎数+死胎数 着床数 Χ100% 畸胎出现率（%）= 出现畸形胎仔总数 活产胎总数 Χ100% Company Logo （7）结果判定方法 活胎仔平均畸形出现数（%）= 畸形总数（活胎） 活胎总数 Χ100% 母体畸胎出现率（%）= 出现畸胎的母体数 妊娠母体总数 Χ100% Company Logo （7）结果判定方法 以上结果，经统计学处理后，若试验组母体畸胎出现率高于对照组，活胎仔畸形出现率高于对照组，而且畸形的出现具有剂量-效应关系时，才能判定外源化学物对受试动物具有致畸作用。 采用致畸指数来比较不同致畸物对受试动物的致畸效应强度。 致畸指数——母体LD50与胎仔最小致畸作用剂量之比。 致畸指数〈10，不具致畸作用 致畸指数10~100，具有致畸作用 致畸指数〉100，具有强致畸作用 Company Logo 二、体外致畸作用试验法 受试物作用于体外培养的胚胎、器官、组织等三个层次的试验。可用于研究致畸作用机理和初步筛选化学致畸物。 Company Logo 第四节 繁殖试验 外源化学物对生殖过程作用的评定主要通过繁殖试验来进行。 繁殖试验可以全面反映外源化学物对性腺功能、发情周期、交配行为、受孕、妊娠过程、分娩、授乳以及幼仔断乳后生长发育可能发生的影响。 Company Logo 一、试验方法： 多选用健康刚断乳的大鼠。每组20只雌鼠，10只雄鼠。 （1）动物选择 （2）剂量选择 高剂量组：慢性毒性试验的最大无作用