流式细胞分析.pptVIP

前向散射光（forward scatter, FS）：激光束照射细胞时，光以相对轴较小角度(0.5°～10°)向前方散射的讯号用于检测细胞等粒子的表面属性，信号强弱与细胞体积大小成正比。 FALS Sensor Laser 前向散射光示意图 侧向散射光（side scatter, SS）：激光束照射细胞时，光以90°角散射的讯号，用于检测细胞内部结构属性。 FALS Sensor 90LS Sensor Laser 侧向散射光示意图 测得的FS与SS信号通过计算机处理，可得到FS-SS图，由此可仅用散射光信号对未染色的活细胞进行分析或分选。 此为血细胞分类的基本原理，但不能分析表面分子。 淋巴细胞 单核细胞 中性粒细胞 光散射测量最有效用途：从非均一群体中鉴别出某些亚群 荧光信号 激光的作用原理 当携带荧光素的细胞与激光正交时，受激发发出荧光，经过滤光片分离不同波长的光信号分别到达不同的光电倍增管，光电倍增管将光信号转换成电信号。电信号输入到放大器放大，放大器分两类：线性放大和对数放大。 常用荧光染料 目前台式机FCM配置 488nm激光管常用染料有 PI (Propidium Iodide)碘化丙啶 PE (Phycorey- thrin)藻红蛋白 FITC (Fluorescein Isothiocyanate)异硫氰酸荧光素 PerCP