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目
录
英文缩略词表……………………………………………………………1
中文摘要…………………………………………………………………2
英文摘要…………………………………………………………………4
前言………………………………………………………………………6
材料与方法………………………………………………………………8
结果………………………………………………………………………15
讨论………………………………………………………………………16
结论………………………………………………………………………19
参考文献…………………………………………………………………20
个人简历…………………………………………………………………24
致谢………………………………………………………………………25
综述………………………………………………………………………26
英文缩写一览表
英文缩写
ppENK
nPCR
BSP
Taq
DNA
Bp
CpG
dNTP
DNMT
EB
5mC
SAM
TSG
MGMT
英文全称
Preproenkephalin
Nest Polymerase chain reaction
Bisulfite sequence polymerase chain
Taq DNA polymerase
Deoxyribonucleic acid
Base pair
Cytosine phosphate guanosine
Deoxyribonucleoside triphosphate
DNA methylation transferase
Ethedium bromide
5methylated cytosine
S-adenosylmethionine
tumor suppressor gene
O6- methylguanine DNA
methyltransferase
中文全称
前脑啡肽原
巢氏聚合链反应
亚硫酸氢盐修饰后测序
耐热 DNA 聚合酶
脱氧核糖核苷酸
碱基对
CpG 岛
脱氧核糖核苷三磷酸
DNA 甲基转移酶
溴化乙锭
5 甲基胞嘧啶
S-腺苷甲硫氨酸
抑癌基因
O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转
移酶
P16
MTSl
/
cyelin
dependant
kinase 多种肿瘤抑制基因 1 或周期
inhibitor 2
—1—
素依赖激酶抑制物 2
脑胶质瘤中 ppENK 基因启动子区的甲基化状态研究
中文摘要
目的
表观遗传学修饰的DNA甲基化在肿瘤的发生发展中起着重要的作用。肿瘤细胞的
发生常存在多基因的异常甲基化现象,尤其是抑癌基因的高甲基化与脑胶质瘤的
发生发展密切相关。本研究旨在采用巢氏聚合酶链反应(nPCR法)和亚硫酸氢盐修
饰后测序法(BSP法)方法检测脑胶质瘤组织中候选抑癌基因ppENK基因启动子区
的甲基化状态,探讨ppENK基因启动子的异常甲基化水平在脑胶质瘤发生发展中
的作用以及与临床病理资料之间的关系。
方法
采用巢式聚合酶链反应(nested polymerase chain reaction nPCR)方法和亚硫酸氢盐
修饰后测序法(Bisulfite sequence polymerase chain reaction BSP),检测 32 例脑胶质
瘤组织和 10 例正常脑组织中 ppENK 基因启动子区 CpG 岛的甲基化状态。利用所
学统计学方法分析 ppENK 基因启动子的异常甲基化水平与临床病例资料(病理分
级、年龄、性别、病理分型)之间的关系。本实验中 32 例脑胶质瘤标本均经病理
证实, 术前未进行放疗或化疗。10 例正常脑组织标本来源脑外伤颅内减压手术患
者。
结果
10例正常脑组织中未检测到ppENK基因启动子甲基化现象。
对实验组32例脑胶质瘤标本进行甲基化修饰及测序检测,其中13例检测出发生
ppENK基因启动子甲基化,甲基化率为40.6%,远高于对照组(正常脑组织)的甲
基化率0%(0/10),两者差异存在统计学意义(P =0.015)。
低级别组(I-II 级)和高级别(Ⅲ-IV 级)胶质瘤中 ppENK 基因启动子甲基化率分别为
21.1%和 69.2%,通过分析表明两者之间存在统计学意义 (P=0.006)。而 ppENK 基
—2—
因的甲基化与性别、年龄、病理类型无明显相关性。
结论
ppENK基因启动子的CpG岛在脑胶质瘤中存在高甲基化现象,可能与脑胶质
瘤发生有关。ppENK基因启动子的甲基化状态与胶质瘤病理分级有关,与年龄、
性别、病理分型无关。作为候选抑癌基因的ppENK甲基化在脑胶质瘤诊断、治疗
方面有着重大意义。
关键词:ppENK; 甲基化; 胶质瘤
—3—
Methyla
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