2.2.1多克隆抗体制备流程及ELISA效价检测-中国毒理学会.docVIP

FRY抑癌蛋白在乳腺癌中的表达及意义 张辰子基金项目：国家自然科学基金项目资助（项目编。作者简介：张辰子（1988-），女，硕士，研究方向：卫生毒理与模式动物学。*：通讯作者，唐小江，主任医师，博士生导师，Tel：020Email： 基金项目：国家自然科学基金项目资助（项目编。 作者简介：张辰子（1988-），女，硕士，研究方向：卫生毒理与模式动物学。 *：通讯作者，唐小江，主任医师，博士生导师，Tel：020Email： HYPERLINK mailto:river-t@126.com river-t@126.com；任雪峰，副教授，博士生导师，Email： HYPERLINK mailto:xuefengr@ xuefengr@. 林忠宁5，任雪峰1*，唐小江1* [1.广东省医学实验动物中心 广东佛山 528248；2.中山大学附属第六医院（附属胃肠肛门医院） 广东广州 510655；3.广东省韶关市第一人民医院 广东韶关 512000；4.南方医科大学公共卫生学院 广东广州 510515；5.厦门大学公共卫生学院 福建厦门 361005] 【摘要】 目的 研究乳腺非癌病例和不同分期的乳腺癌病例中FRY抑癌蛋白表达情况及其与临床病理参数之间的关系。方法 间接酶联免疫吸附实验（ELISA）及Western Blot实验检测自制抗人FRY多克隆抗体特异性，并对20例乳腺癌病例用自制FRY多克隆抗体与商品化FRY抗体分别进行免疫组化检测，验证抗体的可行性；用自制FRY多克隆抗体对11例纤维囊性乳腺病及63例不同分期分级的乳腺癌病的中FRY蛋白表达情况进行检测，用χ2检验（或精确概率法）比较FRY蛋白表达情况与不同临床病理参数的关系。结果 间接ELISA和Western Blot实验结果显示自制FRY多克隆抗体可较特异识别目的FRY蛋白，且自制抗体和商品化抗体对20例乳腺癌病例检测结果一致（χ2=0.417，P 0.05）；11例纤维囊性乳腺病与63例乳腺癌病例中FRY阳性率分别为63.64%和26.98%，差异有统计学意义（χ2=5.741，P0.05）；63例乳腺癌病例中，FRY的表达在不同肿瘤直径大小、不同淋巴结转移情况、TNM分期、不同雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）表达水平之间均有显著性差异（P0.05）；而在其他临床病理参数间无明显差异（P＞0.05）。结论 FRY蛋白在乳腺非癌病例中表达高于癌症病例，并且其与乳腺癌恶性程度及激素受体水平有联系，验证了其可能具有的抑癌作用。 【关键词】 FRY；抑癌蛋白；乳腺癌；免疫组化 Expression and Clinical Significance of Tumor Suppressor Protein FRY in Human Breast cancer ZHANG Chen-zi1, ZHAO Jin-ming2, CHEN Hua-jun3, DU Ri-chang3, SUN Xia1, HUANG Wei1, REN Hai-tao1, YANG Lin1, FEI Fan4,1, LIN Zhong-ning5, REN Xue-feng1*, TANG Xiao-jiang1*. (1.Guangdong Medical Laboratory Animal Center, Foshan, 528248; 2.The Sixth Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou, 510655; 3.Shaoguan First People’s Hospital, Shaoguan, 512000; 4.School of Public Health, Southern Medical University, Guangzhou, 510515; 5.School of Public Health, Xiamen University, Xiamen, 361005.) Abstract Objective To investigate the expression of tumor suppressor protein FRY in human breast cancer tissues and its relationships with different clinical parameters. Methods ELISA and Western Blot assays were used to test the specificity of the self-made anti-FRY polyc