基于LC-MSMS筛选宫颈病变和宫颈癌发生发展过程中的新型.PDFVIP

J South Med Univ, 2019, 39(1): 13-22 doi 10.12122/j.issn. 1673-4254.2019.01.03 ·13 · 基于基于LC-MS/LC-MS/MSMS 筛选宫颈病变和宫颈癌发生发展过程中的新型筛选宫颈病变和宫颈癌发生发展过程中的新型 蛋蛋白标志物白标志物 1 2 2 2 3 1 4 2 邱 峰 ，陈 富 ，刘冬冬 ，徐建华 ，何静玲 ，肖菊姣 ，操龙斌 ，黄宪章 1 4 2 南方医科大学南海医院 全科医学中心，医学检验科，广东 佛山 528244 ；广东省中医院检验科，广东 广州 3 510120 ； 广东省中医院妇科，广东 广州 510120 摘要：目的 筛选可用来指示宫颈癌从癌前病变到癌变的血浆蛋白标志物，并分析其潜在机制与功能。方法 收集健康人 （Control 组），低度鳞状上皮内病变（LSIL）、高度鳞状上皮内病变（HSIL）、宫颈癌（CC）和治疗后患者血浆样本富集低丰度蛋 白。LC-MS/MS 检测样本的全多肽类型与序列，检测结果用Proteome Discoverer 2.2 进行数据库检索，筛选差异蛋白类型与种 类（要求Coverage≥20% ，且Unique Peptides≥2 蛋白质），LSIL、HSIL、CC 组分别与Control 组进行T检验比较，P≤0.05 视为表达 有显著差异的蛋白。通过观察差异蛋白在各组中的色谱图筛选出能提示宫颈病变及宫颈癌的潜在标志物及预后效能评估标记 物，并通过靶向蛋白组学技术，在上述实验的基础上样本量对潜在蛋白标记物在各组的含量进行验证实验。进一步通过蛋白功 能、功能富集及共表达分析明确差异蛋白的功能探讨其作为标志物的意义与病理机制。结果 基于LC-MS/MS 和蛋白组学分析 发现LSIL、HSIL 组相较于Control 组分别存在9个异常表达蛋白，CC 组相较于Control 组存在5个差异蛋白。其中ORM2、HPR 在LSIL 组相对于Control 组的表达存在一定差异，可能是指示宫颈癌癌前病变的潜在标志物；F9 在LSIL、HSIL、CC 组中相对于 Control 组，随着疾病的发展呈上升趋势，是一种潜在的指示宫颈病变程度的蛋白标记物；CFI、AFM 蛋白在预后组和CC 组差异 明显，是一类潜在的评价疗效和预后的蛋白指标。各组中的差异蛋白在功能富集分析中发现与补体和凝血级联反应通路有 关。结论 F9、CFI、AFM、HPR、ORM2 五种新型蛋白可能是指示宫颈病变程度、疗效和预后的潜在标志物，联合分子标志物来 评估宫颈病变的发生发展可以增强诊断的灵敏度和特异性，具有一定的临床应用前景。 关键词：宫颈癌；LC-MS/MS ；蛋白组学；血浆标志物 LC-MS/MS-based screening of new protein biomarkers for cervical precancerous lesions and cervical cancer 1 2 2 2 3 1 4 2 QIU Feng , CHEN Fu , LIU Dongdong , XU Jianhua , HE Jingling , XIAO Jujiao , CAO Longbin , HUANG Xianzhang 1General Practice Center, 4Department of Laboratory Medicine, Nanhai Hospital, Southern Medical University, Foshan 528244, China; 2Department of Laboratory