哈维氏弧菌FlaA基因的克隆序列分析及真核表达质粒的构建-海洋学报.PDF

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29 6 Vol1 29, No1 6 2007 11 ACTA OCEANOLOGICA SINICA November 2007 FlaA 1 1 1 1* 1 庄 轩 , 覃映雪 , 苏永全, 王 军 , 丁少雄 ( 11 , 361005) : 哈维氏弧菌是水产病害中常见的致病菌1 参照基 库上登录的弧菌鞭毛丝蛋白FlaA 基 序 列设计简并引物, PCR 扩增哈维氏弧菌TS 628 株的FlaA 全基 , 并克隆到pMD 18 T 载体中测 序, 经序列分析该基 全长1 140 bp, 编码379 个氨基酸1 与基 库中其他弧菌的同源基 序列比较 显示, 哈氏弧菌FlaA 基 与霍乱弧菌FlaA 基 的同源性最高(7915%) , 该基 编码的多肽缺乏半 胱氨酸, 并在N , C 两端的氨基酸序列较为保守, 中间区域的变异较大1 对该蛋白的氨基酸组成及 空间结构进行了分析和预测, 并推测该蛋白质的平均分子量为401 6 kDa1 在该基 末端加上一段编 码Flag 短肽的核苷酸序列后克隆到真核表达载体pcDNA31 1( + ) , 获得带哈氏弧菌鞭毛丝蛋白FlaA 基 的真核表达重组质粒pcDNA FlaA tag, 为其DNA 疫苗的进一步研究奠定了基础1 : 哈维氏弧菌; F laA 基 ; 基 克隆; 序列分析; 真核表达重组质粒 : S94, Q74 : A : 0253 0493(2007) 06 0074 06 DNA 1 1 DNA ( Vibr io harvey i) , , , [ 5] , , 1 [ 1] , DNA , , , 1 , , [ 6] , , 1 DNA [ 2] , ; , , 1 ( IHNV) , ( VHSV) [ 7] , 1 DNA , 1 , ( V1 p ar ahaemo- [ 3] IgM , ly ticus) FlaBFlaI [ 4] [ 8, 9] , , 1 1 , : ( K ) : 2006 05 10; : 2006 10 231 : 863 ( 2003AA603011) ; ( 2002N009)1 : ( 1982) ) , , , , 1 E mail: zhuangxuan@ gmail. com * ,junw @ xmu. edu. cn 6 : Fl aA

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