九种单核细胞增生性李斯特菌检测技术 效果比较及评价.pdfVIP

中国生物工程杂志 China Biotechnology ，20 12 ，32 (6):84 -92 九种单核细胞增生性李斯特菌检测技术 效果比较及评价 1，2 3 1 2 * 4 1 5 刘雅莉 刘 芳 韩舜愈 刘 箐 孙志博 夏俊芳 朱小清 (1 甘肃农业大学食品科学与工程学院 兰州 730070 2 上海理工大学医疗器械与食品学院 上海 200093) (3 甘肃出入境检验检疫局国际旅行卫生保健中心 兰州 730020 4 兰州大学基础医学院 兰州 730000) (5 甘肃出入境检验检疫局 兰州 730020) 、 、 ELISA (TAS-ELISA)、 摘要 采用传统生物学方法 显色培养基方法 自制三抗体夹心 试剂盒 基因 PCR (DNA Direct-PCR)、 PCR (Bacterium Direct-PCR)、 PCR (IC- 组直接 菌裂解直接 免疫捕捉 PCR)、 PCR (Bio-PCR)、SYBR Green PCR (SYBR Green Real time-PCR)、 生物 染料实时荧光 探针实 时荧光PCR (TaqMan Real time-PCR)检测纯菌液及模拟带菌食品中的单核细胞增生性李斯特菌 (Listeria monocytogenes ，LM)。 : ;TAS-ELISA 、DNA 结果表明 传统生物学培养方法出现假阳性 6 2 5 4 Direct-PCR 、Bacterium Direct-PCR 、IC-PCR 10 、10 、10 、10 CFU / ml ; 最低检测限分别为 显色培养 2 基、SYBR Green Real time-PCR 灵敏度达10 CFU / ml ;Bio-PCR 、TaqMan Real time-PCR 检测灵敏度 1 ， 10 CFU / ml 。 、TAS-ELISA ， ;IC-PCR 最高 均为 显色培养基 操作简单 适合大量样品的初检 具有灵 敏、 、 、 ， ;Bio-PCR 、TaqMan Real time- 特异 快速 经济的优点 特别适合大体积样品中微量病原的检测 PCR 、 ， 。 灵敏度高 特异性好 适合阳性样品的复检以及科研使用 关键词 单核细胞增生性李斯特菌 三抗体夹心ELISA 免疫捕捉PCR 生物PCR 实时荧光 定量PCR 中图分类号 Q819 (Listeria monocytogenes ， ［10-11］、 ［12］