抗双链DNAdsDNA-北京和杰创新生物医学科技有限公司.DOC

北京和杰创新生物医学科技有限公司 PAGE 第 PAGE 4页 共 4 页 北京和杰创新生物医学科技有限公司 第 1 页 共 4 页 抗双链DNA（dsDNA）抗体检测试剂盒 （间接免疫荧光法） 说 明 书 【产品名称】 中文名称：抗双链DNA（dsDNA）抗体检测试剂盒（间接免疫荧光法） 英文名称：Detection Kit for Anti-double stranded DNA Antibody（Indirect Immunofluorescence） 【包装规格】 30人份/盒；50人份/盒；100人份/盒。 【预期用途】 北京和杰创新生物医学科技有限公司生产的抗双链DNA（dsDNA）抗体检测试剂盒（间接免疫荧光法），用于定性检测人血清或血浆中的抗双链DNA（dsDNA）抗体，辅助诊断系统性红斑狼疮。 【检测原理】 本试剂盒采用间接免疫荧光法（Indirect Immunofluorescence，IIF）检测抗dsDNA抗体，抗原为培养好的短膜虫，在与病人待测血清反应后，加入荧光素（FITC）标记的兔抗人IgG抗体，最终在荧光显微镜下观察结果。 【主要组成成分】 序号 组成 剂型 规格 数量 1 dsDNA抗原片 固体 3人份/张（30人份）、5人份/张（50人份）、10人份/张（100人份） 10张 2 荧光二抗 液体 1mL/支（30人份）、1.5mL/支（50人份）、3mL/支（100人份） 1支 3 抗dsDNA阳性对照 液体 0.3mL/支 1支 4 抗dsDNA阴性对照 液体 0.3mL/支 1支 5 封片剂 液体 4mL/支 1支 6 吐温 液体 2mL/支 2支 7 PBS粉剂 固体 12.2克/袋 2袋 8 盖玻片 固体 15片/盒 1盒 9 使用说明书 —— 1份 1份 其中，dsDNA抗原片主要组分为绿蝇短膜虫；荧光二抗主要组分为FITC标记的兔抗人IgG。 【储存条件及有效期】 2-8℃避光保存，有效期6个月 【样本要求】 人血清或血浆，要求清亮、无沉淀、无黄疸； 样本1周以内检测可在4℃条件下贮存。 【检验方法】 1.准备：取出dsDNA抗原片，待其恢复至室温后剪开包装。将洗涤用的PBS粉剂用蒸馏水溶解至1L，加入2ml吐温，混匀后作洗涤和标本稀释用。 2.稀释：待测血清用洗涤液作1:10稀释。 3.加样：在抗原片的反应孔内分别加入稀释好的血清和阴阳性对照，25μl/孔。注意：加样时避免产生气泡。 4.孵育：将抗原片盖在倒扣板对应的凹槽里，室温孵育30min。注意：确保每个标本均能够与抗原基质相接触，而标本之间不相互接触。 5.洗涤：取出抗原片，用洗涤液轻轻从一侧将反应液冲洗掉，浸泡至洗片缸内，静置5 min后，再用蒸馏水冲洗1次。 6.加样：在抗原片的反应孔内加入dsDNA荧光二抗，25μl/孔。注意：加样时避免产生气泡。 7.孵育：用纸擦去抗原片周边和反面多余液体后，将抗原片盖在倒扣板对应的凹槽里，室温孵育30min。注意：确保每个标本均能够与抗原基质相接触，而标本之间不相互接触。 8.洗涤：重复步骤5。 9.封片：?在盖玻片上滴加封片剂。用纸擦干抗原片周边和反面多余液体后，将载片的抗原基质朝下置于准备好的盖玻片上，完成封片。 10.结果观察：荧光显微镜下观察结果。 【参考值（参考范围）】 dsDNA阴性时短膜虫虫体轮廓清晰，附有鞭毛，虫体内无荧光；阳性时核与动基体表现为均质或环状荧光，成对出现。 【检验结果的解释】 显微镜下可见均匀密布的短膜虫，阴性时虫体轮廓清晰，附有鞭毛，虫体内无荧光，有时鞭毛附着点会有弱的非特异点状荧光。 阳性时核与动基体表现为均质或环状荧光，成对出现。核较大，位于虫体一端；动基体较小靠近鞭毛端且居中（有时似突出虫体外），虫体轮廓常因荧光相衬而消失。 【检验方法的局限性】 该试剂盒只提供抗dsDNA抗体的检测结果，具体病情及诊断应由临床医生结合临床表现和其他信息综合判断。【产品性能指标】 阳性符合率：从室内阳性质控品P1-P10（共计10份阳性血清标本）中随机抽取3 支用试剂盒进行检测，其检测结果均为阳性。 阴性符合率：把两只阴性质控血清（N14-N15）和从室内阴性质控品13份（N1-N13）室内阴性质控品中随机抽取的3 支用试剂盒进行检测，其检测结果均为阴性。 批内重复性：用试剂盒测定1份室内阳性质控品，重复检测5孔，其检测结果均为阳性。 批间重复性：用3个批号的试剂盒测定1份室内阳性质控品，每批重复检测5孔，其检测结果均为阳性。 最低检出限：用企业内部检出限