Bmo-miR-2771对家蚕丝胶蛋白基因BmSer-1表达的调控作用.PDFVIP

Science of Sericulture 蚕业科学 2016 ，42 (5):0826 － 0831 ISSN 0257 － 4799 ;CN 32 － 1115 /S DOI :10． 13441 /j． cnki． cykx． 2016． 05． 011 Bmo- miＲ-2771 对家蚕丝胶蛋白基因BmSer - 1 表达的调控作用 钱 平1，2 蒋 涛1，2 王 欣1，2 宋 菲1，2 陈 晨1，2 范洋洋1，2 唐顺明1，2 沈兴家1，2 1 2 (江苏科技大学生物技术 ， ， 212018 ; 中 ， 学院 江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室 江苏镇江 国农业科学院蚕业研究所 农业部蚕桑 ， 212018) 遗传改良重点开放实验室 江苏镇江 摘 要 微小ＲNA (miＲNA) mＲNA ＲNA 。 可通过抑制 转录或使 降解的方式在转录后水平调节靶基因的表达 研究与家蚕丝 1 (BmSer-1) miＲNA (Bmo-miＲ) ， 。 胶蛋白基因 转录后表达有关的 及其作用方式 以丰富丝胶蛋白基因表达的精细调控信息 首 先从miＲBase 21 数据库中获得全部成熟体 Bmo-miＲ ，通过生物信息学分析筛选到一个对BmSer-1 有潜在调控作用的 Bmo- miＲ ， Bmo-miＲ-2771 。 ， ＲT-PCＲ Bmo-miＲ-2771 BmSer-1 5 命名为 设计茎环引物 采用半定量 方法检测 及其预测靶基因 在家蚕 3 d 、 、 、 、 、 ， Bmo-miＲ- 龄 幼虫头部 脂肪体 前部丝腺 中部丝腺 后部丝腺 中肠等组织器官以及血淋巴细胞中的表达水平 结果显示 2771 ， BmSer-1 。 Bmo- 特异性地在中部丝腺中表达 并且靶基因 在中部丝腺的相对表达量也明显高于其他组织 将构建的表达 miＲ-2771 的重组质粒pcDNA3. 0 (ie1-egfp-pri-miＲ-2771-SV40)和表达BmSer-1 3-UTＲ 的重组质粒pGL3 (A3-luc-Ser-1 3UTＲ- SV40) BmN ， pcDNA3. 0 (ie1-egfp-SV40) pGL3 (A3-luc-Ser-1 3UTＲ-SV40) BmN 共转染家蚕卵巢培养细胞