苦参汤有效部位总黄酮含量测定方法研究-中国科技论文在线.PDF

苦参汤有效部位总黄酮含量测定方法研究 刘 斌 石任兵 周素蓉 （北京中医药大学中药学院 北京 100102 ） 摘要：目的 建立苦参汤有效部位中总黄酮含量测定方法。方法 以黄芩苷为对照品，采用盐 酸-镁粉反应比色法测定总黄酮含量。 结果 黄芩苷在 6.971-34.857ug/ml 范围内与吸光度呈良 好的线性关系，回归方程为 C=0.0221A+0.0053 （r2=0.9994 ）。黄芩苷平均回收率为 103.59%， RSD=0.74% （n=5 ）。结论 3 批样品测定结果表明，所建立的方法简便、准确，可用于苦参汤 有效部位总黄酮含量测定。 关键词：苦参汤；有效部位；总黄酮；黄芩苷；盐酸-镁粉反应比色法；含量测定 苦参汤始载于《千金方》，由苦参、黄芩、地黄三味中药组成，具有清热燥湿、泻毒养阴 的功效，用于发热五六日以上。现代主要用于治疗阴道炎、泌尿道感染、淋病、慢性结肠炎、 慢性肝炎、病毒性心肌炎、心律失常、冠心病以及多种皮肤病等[] 。我们运用复方有效部位研 究思路与方法[1]，对苦参汤有效部位进行了分离富集，并且根据复方有效部位及其主要化学成 分的研究分析，确定以复方有效部位中总生物碱、总黄酮以及主要有效成分苦参碱、氧化苦 参碱、黄芩苷的含量为指标，控制和评价苦参汤有效部位的质量。本文首先报道了苦参汤有 效部位中总黄酮的含量测定方法，并对 3 批样品进行了含量测定。 1 仪器与试药 1/100000 电子分析天平（日本岛津公司）；Hitachi U-2000 型紫外-可见分光光度计（日本 岛津公司）。 苦参、地黄、黄芩药材购自北京同仁堂医药集团北城批发部，经鉴定分别为豆科植物苦 参 Sophora flavescens Ait.的干燥根，玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa Libosch. 的干燥块根 和唇形科植物黄芩 Scutellaria baicalensis Georgi 的干燥根；黄芩苷对照品（供含量测定用）购 自中国药品生物制品检定所。 2 方法与结果 2.1 供试液制备 对照品溶液：精密称取黄芩苷对照品适量，加 50%乙醇制备成 0.1mg/mL 的对照品溶液。 样品溶液 I ：精密称取苦参汤有效部位约 6mg，置 5mL 量瓶中，加 50%乙醇溶解并稀释 至刻度，摇匀，作为样品溶液 I 。 样品溶液 II ：根据苦参汤原方比例，称取苦参、黄芩二药，混合，按苦参汤有效部位制 备工艺制备样品后，采用样品溶液 I 制备方法制备样品溶液 II 。 阴性样品溶液：根据苦参汤原方比例称取地黄，按苦参汤有效部位制备工艺制备阴性样 品后，采用样品溶液I 制备方法制备阴性样品溶液。 2.2 显色试剂及测定波长的选择 盐酸-镁粉反应显色法：精密吸取黄芩苷对照品溶液 2ml ，样品溶液 I 、II 及阴性样品溶 液各 0.5ml，置加有镁粉 300mg 的具塞刻度试管中。将试管置冷水浴（15℃左右）中，缓慢 滴加浓 HCl 3mL ，并不时振摇试管。最后加 50%乙醇补足至 7ml，摇匀，置沸水浴中加热 60min， 取出，迅速冷却至室温，在 400~700nm 范围内扫描测定吸收光谱。黄芩苷对照品和样品 I 显 色前后的吸收光谱见图 1。 Al(NO ) -NaNO -NaOH 显色法：精密吸取黄芩苷对照品溶液 3ml，样品溶液 I 、II 及阴 3 3 2 性样品溶液各 2ml ，分别加入 5% NaNO 1.0ml，放置 6min，然后加入 10% Al(NO ) 1.0ml，混 2 3 3 １ 转载 中国科技论文在线