各种免疫分析技术的名词解.doc

PAGE PAGE 1 各种免疫分析技术的名词解 放射免疫分析 放射免疫分析(Radioimmunoassay,RIA)是用放射性同位素标记抗原Ag*,该抗原与未标记抗原Ag竞争结合抗体(Ab)结合位点时的能力相同。如果将Ag*、Ab的量固定并使Ag*和Ag的相应抗原决定簇数目超过Ab的结合位点数，则生成的Ag*-Ab复合物就与Ag的量呈负相关：Ag增加，则Ag*-Ab减少；反之Ag*-Ab上升，Ag*-Ab的生成量可通过测定其放射活性得到。因此，如果测定出样品的放射活性，就可根据已知浓度抗原的标准曲线计算出样品中抗原浓度，这种分析方法称为放射免疫分析。免疫放射分析 免疫放射分析（Immunoradioassay,IRA）是用放射性同位素标记的抗体Ab*与样品中的抗原Ag反应，然后用固相抗原免疫吸附剂去掉未结合的Ab*，测定上清液中的放射活性就可计算出生成Ag-Ab*的量，此量与样品中抗原的量成正比，以此计算出样品抗原浓度。 均相酶免疫分析 均相酶免疫分析（HomogeneousEnzymeImmunoassay）为酶免疫分析的一种，由于酶标记的抗原在参与免疫反应后有酶活性的改变，标记抗原与待测样品中的抗原相互竞争与有限量的抗体结合，因此不需要将游离的酶标记物与结合后的酶标记物分开，直接测定酶活性的变化即可计算出待测抗原的含量。 酶增强免疫分析 酶增强免疫分析（EnzymeMultipliedImmunoassayTechnique,EMIT）属于均相酶免疫分析方法，采用此方法，酶标记的抗原Ag*同时具有抗原和酶的活性。Ag*与有限量的Ab结合成AbAg*后，抗体可影响酶的活性中心而使酶的活性被明显抑制；加入未标记抗原Ag后，Ag即与Ag*竞争结合有限的Ab形成AbAg复合物，使得酶活性被抑制的AbAg*减少，具有酶活性的游离Ag*增加，反映液中酶的活性随Ag凝度的增加而加强，因此称此反应为”酶增强免疫”。 酶免疫分析 酶免疫分析（EnzymeImmunoassay,EIA）是一种将酶的催化放大作用与抗原抗体免疫反应的特异性相结合的微量分析技术。用酶标记的抗原或抗体与样品中待测抗原或抗体发生免疫反应后生成有酶标记的抗原抗体复合物，然后在反映液中加入底物，酶催化底物水解显色，由于颜色变化可放大酶量的变化，因此通过测定吸光度的改变可计算出待测抗原或抗体的浓度。 非均相酶免疫分析 非均相酶免疫分析（HeterogneousEnzymeImmunoassay）为酶免疫分析的一种，酶标记的抗原在参与免疫反应后要将游离的酶标记物与结合后的酶标记物分离开。 时间分辨荧光免疫分析 时间分辨荧光免疫分析（TimeresolvedFluoroimmunoassay,TRFIA）是一种非同位素免疫分析技术，它用镧系元素标记抗原或抗体，根据镧系元素螯合物的发光特点，用时间分辨技术测量荧光，同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨，可有效地排除非特异荧光的干扰，极大地提高了分析灵敏度。 解离增强镧系元素荧光免疫分析 解离增强镧系元素荧光免疫分析（DissociationEnhancedLanthanideFluoroimmunoassayDELFIA）是时间分辨荧光免疫分析中的一种。它用具有双功能基团结构的螯合剂，使其一端与铕（Eu）连接，另一端与抗体/抗原分子上的自由氨基连接，形成EU标记的抗体/抗原，经过免疫反应之后生成免疫复合物。由于这种复合物在水中的荧光强度非常弱，因此加入一种增强剂，使Eu3+从复合物上解离下来，自由Eu3+同增强剂中的另一种螯合剂螯合形成一种胶态分子团，这种分子团在紫外光的激发下能发出很强的荧光，信号增强了百万倍。因为这种分析方法使用了解离增强步骤，因此称为解离增强镧系元素荧光免疫分析。