丙型肝炎病毒的检测策略及其应用.doc

PAGE PAGE 1 丙型肝炎病毒的检测策略及其应用 中国疾病预防控制中心杨芳、邢文革丙型肝炎病毒（HCV）引起丙型肝炎，因临床症状不明显，易造成漏诊或误诊，延误治疗；因此，临床医生将HCV实验室检测结果作为主要的诊断依据，以便及时采取相应措施，有利于疾病诊断、治疗和阻断HCV传播；血站通过HCV检测 　 中国疾病预防控制中心　杨芳、邢文革 　　丙型肝炎病毒（HCV）引起丙型肝炎，因临床症状不明显，易造成漏诊或误诊，延误治疗；因此，临床医生将HCV实验室检测结果作为主要的诊断依据，以便及时采取相应措施，有利于疾病诊断、治疗和阻断HCV传播；血站通过HCV检测筛查献血员可以有效阻断血液传播这一途径，保障血液及血液制品安全；HCV检测也为公共卫生人员进行人群监测，掌握人群HCV感染情况提供依据。各国HCV感染情况有差别，且HCV检测的目的不同，因此，制定的HCV检测策略既需能达到预期目标，又需符合成本效益原则。 　　 HCV检测一般分为筛查检测和补充检测。筛查检测主要为酶联免疫吸附法（ELISA）。ELISA可重复性强，成本低，且第三代ELISA试剂盒敏感性和特异性比第二代试剂有较大提高，美国食品与药物管理局（FDA）和我国国家药品监督管理局已批准抗-HCVELISA试剂盒用于HCV检测。由于ELISA的优点，世界卫生组织认为ELISA适合用于大量样本检测，发达国家已将其用于献血者筛查。但由于一般人群的HCV感染率低，且仍存在假阳性的问题。美国疾病预防与控制中心报告指出：HCV感染率lt;10%的人群（如自愿献血者，卫生服务工作者等），抗-HCVELISA检测假阳性率约35%；免疫系统抑制人群，其检测假阳性率约15%。抗-HCVELISA假阳性主要原因包括：血液中存在高浓度非特异性IgG或类风湿因子吸附于固相载体或包被的抗原；受检样本中超氧化物歧化酶的干扰；用于制备试剂的HCV抗原不纯。因此，美国疾病预防与控制中心的报告指出不能依靠单一的抗-HCV筛查阳性结果作出诊断，应采用补充试验作为报告依据，而有的国家建议只在高危人群中采用ELISA进行筛查。世界卫生组织报告指出，适合个体筛查的简易/快速检测因所需设备简易，检测速度快，多用于设备配置简陋或日检测样本量少的实验室。除了ELISA，化学发光免疫检测等检测方法也用于抗体筛查。 　　 针对免疫系统正常、HCV感染率低于10%的一般人群中，抗体筛查假阳性率较高的情况，需要对阳性样本进行补充检测。补充检测包括重组免疫印迹试验（recombinantimmunoblotassay，RIBA）和HCV-RNA检测。RIBA检测特异性较ELISA高，但敏感性稍逊；且RIBA在操作上较ELISA复杂、耗时、成本高，不利于其在临床上的应用。美国HCV检测实验室指南建议临床方面可以根据筛查试验的S/CO比值（signal-to-cut-off），确定是否需要做补充检测的替代方案。英国和澳大利亚的检测策略则没有将RIBA作为补充检测，只是作为推荐试验。 　 　HCV-RNA检测分为定性检测和定量检测。目前定性检测采用聚合酶链反应（PCR）和转录介导的扩增两种方法，转录介导的扩增检测限可低至10IU/ml。但由于HCV存在血清转换期，有时存在HCV-RNA阴性，抗体阳性的情况，因此单独HCV-RNA检测结果为阴性不能判断HCV感染情况。PCR检测所需标本保存条件要求较高，操作不当会影响结果，且在方法和设备上要求较高，因此，难以在常规工作或基层实验室推广，限制了普遍应用。HCV定量检测主要为三种方法：定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR），分支DNA检测（branchedDNA，bDNA）和实时PCR。定量RT-PCR检测包括MONITOR2.0和SuperQuant，这两种试剂结果具有可比性。bDNA技术采用信号扩增，检测限为615IU/ml，特异性达到96.0%～98.8%，具有较高的重复性，但敏感性不高。实时PCR则具有高敏感性，检测限可低至10IU/ml，该方法在一定范围内具有良好的线性关系，但该方法目前只作为实验室研究方法使用。现阶段HCV定量核酸检测结果所用单位不统一，造成结果不具有可比性，为临床实际工作带来一定问题。定量检测有助于临床医生对HCV感染者管理和治疗评估。有研究结果表明，基因1型HCV感染者经12周抗病毒治疗后，若病毒载量不能减少到治疗前载量的1%，即使再经1年治疗，达到理想治疗效果的几率也低于5%。尽管单一抗-HCV检测方法还存在各种问题，但如果制定合理的检测策略，能避免单一方法引起的假阴性和假阳性，能较好控制人群新发HCV感染，监测已感染HCV人群。检测策略主要用于血液筛查、临床诊断和人群监测三个方面。 　　 1、血液筛查：HCV可以通过多种途径传播，目前发达