谈谈缓冲液.doc

1．谈谈手动进样器 ??? 进样器有手动式和自动式两种，随着系统自动化的推进，自动进样器已渐趋普及，但作为进样器的主力，恐怕仍然是手动式的，对于手动进样器，我们平时使用时并没有特别留意，但应当指出，如果使用方法不当，也会引起色谱图上出现不良的、标准曲线没有直线性、产生漏液等现象，导致故障。这里以7725型手动进样器为便，谈谈要做到避免故障，正确使用的注意事项。 构造　7725型进样器的构造如图所示，定子上刻有号码，组装时将附属的排出管接于5号和6号。2号必须与泵联接，3号必须与柱相接。在装填样品(Sample load)的状态(向左旋)下，注入样品，接着进样(向右旋)时微量注射器的针头在定子的表面(由于转子的旋转，定子面用硬质陶磁制成)滑动旋转，与5号排出管路相接。同时转子封垫的二个槽落入样品环路介于泵和柱之间的位置。这样一来，样品按与微量注射器装填(Load)时相反的流向。被送入柱中。 操作　注入的方法有环路全量注入和部分注入两种。标准附属的环路为20ml，如果用约100ml的微量注射器注入全量的话，则环路被清洗，并且环路被样品完全充满。如果用此方法进样，则属于“环路进样”能保证有20ml样品量注入，这样做重现性较好。这就是全量注入的方法。 　　部分注入的方法是在以环路容量作为最大的范围下，通过微量注射器注入样品进行进样。这一方法虽然微量注射器的计量误差将影响重现性，但也有其有利性，即只要改变注入容量，就可从同一浓度的标准试样中作出标准曲线，故最为普遍使用。不论何种方法，使用7125型进样器时，不必取下微量注射器，转动把手即可进样。为了保持针端的密封形状准确，平时请将微量注射器或附属的针插上。 保养　由残余样品引起的样品相互污染(Cross Contamination)在进行反复注入时会给工作带来影响。请将附属的聚四氟乙烯制的针口清理器安装在注射器上，以清洗针口。 　　长期使用后，会产生转子处的漏液或开始向其他流路的泄漏。7725型的转子密封是可以更换的消耗品。(转子密封，P/N 670-12098-51) 耐性　7725型的耐压为350Kgf/cm2。通常这已经足够了，但如有特殊的使用目的，可以通过增紧定子螺栓来达到500Kgf/cm2的耐压规格。不过为延长使用期，仍以在较低耐压规格下使用为宜。 　　7725型的密封材料使用的是称作BESPELò的聚酰亚胺，因此不可用于pH10以上的碱性移动相。此外，自动进样器SIL-10A、10Avp上用的也是BESPELò。 　　同时，SIL-10A上使用了称作DERLINò的聚缩醛。在pH3以下的酸性移动相时DERLINò的将失去耐久性。 ??? 另外，在氨基酸分析系统中，由于要向清洗液通碱性水溶液，因此在使用BESPELò的进样器时需要将密封改变为DERLINò的。 ??? 希望您以正确的使用方法取得有价值的数据。 2．关于样品的注入 　　进样器有手动式和自动式的。虽说近来系统的自动化急速发展，但主要使用的恐怕仍然是手动式的。我想很多人都有这样的经历:在用手动式注入试样进行分析时，标准曲线缺乏直线性，在色谱上出现不良的峰，等量注入了同样的试样而色谱峰的重现性却不好。为什么会产生这样的毛病呢？我想以7725型为例，只限于通过进样器的操作，考虑一下其原因及对策。 使用说明书上对于注入样品时的操作顺序是这样指示的。 ①在把手柄处于进样的位置(以下称进样状态)时，使用附属的针口清洁器和注射器，注入清洗液(通常为移动相)清洗针口。 ②将把手柄扳到load装填的位置(以下称装填状态)，插入微量注射器。 ③注入微量注射器内的样品。 ④切到进样状态。 ⑤在进样状态下拔出微量注射器。 　　在这一系列的操作中，①是非常重要的操作，这一步如有疏漏，便容易发生上面提到过的毛病。这是由于进样器针口的污染可以认为是故障的主要原因。 ??? 请看附图。图1所示是结束上述④的操作后之阶段上的针口。如果在微量注射器的针尖上有样品粘附，或在针尖与进样器的定子面之间有间隙，则如红色所示将有样品残留。如在此状态下进行⑤的操作，则残留的样品将扩散到整个针口(图2)。如果在这里省去①而移到②的操作，则此样品将被挤入样品回路，产生所谓的交叉污染(图3)。因此①的操作，即预先洗掉残留样品，这是防止故障的关键。 ??? 但是每次注入样品时都必须清洗针口，这又是件非常麻烦的事。有没有多少方便些的办法呢？这里可以考虑的是下面的顺序。 ①进样状态时，插入微量注射器。 ②转换到装填状态，注入微量注射器内的样品。 ③转换回进样状态。 ④在进样状态下拔出微量注射器。与前面方法的不同之处在于：是在装填状态下插入微量注射器，还是在进样状态下插入。如果在进样状态下插入，则即使残留有前次注入的样品，它也将被挤出到排出管方向去，而不会引起交叉污染。这个