山杨幼化技术规程-黑龙江质量技术监督局.DOCVIP

DB××/T ××××—×××× PAGE 4 PAGE 2 山杨幼化技术规程 黑龙江省市场监督管理局　发 布2019-××-××实施2019 山杨幼化技术规程 黑龙江省市场监督管理局　发 布 2019-××-××实施 2019-××-××发布 DB23/T ××××—2019 DB23 黑龙江省地方标准 ICS 65.020.40 B 64 DB23/T ××××—2019 Ⅰ 前 言 本标准依据GB/T 1.1-2009的编写规则起草。 本标准由黑龙江省林业与草原局提出并归口。 本标准由黑龙江省林业科学研究所、黑龙江省森林植物园。 本标准主要起草人：卢慧颖、白卉、张妍妍、李静、田新华、谢雷、张建瑛、王艳敏、李正华、张文达、李京、李长海、黎莉、赵明、于晓杰、于腊梅、黄俊杰、李念森、毛洪波。 PAGE \* MERGEFORMAT 3 山杨幼化技术规程 范围 本标准规定了山杨（Populus davidiana ）的根萌幼化技术、组织培养幼化技术及生产档案。 本标准适用于山杨幼化。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6001　育苗技术规程 LY/T 1000-2013　容器育苗技术 LY/T 1882 林木组织培养育苗技术规程 DB23/T 961-2005　山杨无性繁殖配套生产技术 根萌幼化技术 取材时间与材料选择 每年的春秋两季，植株停止生长之后、萌动前，采集粗度为3cm左右山杨树根。 储存条件 山杨根应沙藏，储藏温度为0 ℃～5 ℃，湿度60 %，应适时通风。 埋根条件 土壤温度稳定在10 ℃以上时进行埋根。 根萌基质及消毒 基质宜为草炭土，厚度10 cm～15 cm，基质装入规格50 cm × 30 cm × 20 cm育苗盘后，用800倍的40%多菌灵可湿性粉剂喷淋灭菌。 灭菌处理 将山杨根用多菌灵清洗干净。 埋根方法 截取长度15 cm～30 cm根段平放于草炭土表面，然后封土，达到完全覆盖根系即可。 幼化管理 封土后浇足水，敷上塑料薄膜。待根萌苗长到1 cm～2 cm，撤去塑料薄膜，苗期水分管理按照GB/T 6001规定执行。 根萌苗移栽与管理 待根萌苗长出新根后，长到5 cm～10 cm高，截断新根周围的老根，移栽至育苗容器中。容器苗期栽培管理按照 LY/T 1000―2013中5.5执行。 组织培养幼化技术 外植体选择及保存 外植体应选择无病虫害生长健壮的枝条，采集时间为每年的12月至翌年3月。贮存方式应为低温封存。低温存放温度为0℃以下，湿度50 %～60 %。接种前10 d～15 d将枝条常温水培，隔日换水，待休眠芽萌动后，即可接种 诱导方式选择 选取腋芽或叶片诱导胚性愈伤，待愈伤生成不定芽1 cm～2 cm进行继代培养，每25 d～30 d继代一次，即可保证苗木的幼化。选取腋芽诱导方式，腋芽应培养出丛生芽，应继代3次～5次。 外植体消毒 按DB23/ T 961-2005中5.2规定执行。 培养配制 按照LY/T 1882的规定执行。 培养条件 按DB23/T 961-2005中5.5规定执行。 无菌苗接种 叶片诱导不定芽 在超净工作台中，将灭菌处理的叶片，置于无菌滤纸上吸干水分,切成1 cm2～1.5 cm2 的方形，平铺于培养基表面，每瓶3枚～5枚。接种培养基为以NT＋6-BA1.0 mg/L+KT0.3 mg/L的初始诱导培养基。置于培养室光照培养10 d～20 d后形成不定芽。 腋芽诱导丛生芽 选取萌动后2 cm左右的腋芽，在超净工作台中灭菌处理后，置于无菌滤纸上吸干水分,腋芽下部插于培养基内0.5 cm左右，每瓶5个～8个芽，接种培养基为以1/2MS为基本培养基，附加激素6-BA1.0 mg/L的初始诱导培养基，在10 d～20 d后形成丛生芽。 继代增殖培养 将丛生芽，转移至1/2MS＋6-BA1.0 mg/L+NAA0.02 mg/L的增殖培养基。培养30d后，不定芽基部可平均生长出4.5个不定芽。 生根培养和植株再生 将丛生不定芽分离开，挑选高度1.0cm以上的单株转接到以1/2MS＋IBA1.0 mg/L+NAA0.02 mg/L的生根培养基上，培养25d左右获得完整再生植株。 炼苗与驯化 在移栽前，组培苗应敞开封口在自然光下进行抗性锻炼3 d～5 d，洗掉根上附着的培养基，将根蘸入2 %的高锰酸钾溶液中灭菌后，栽入装有已灭菌蛭石的规格50 cm × 30 cm × 20 cm育苗盘内，3 d～5 d内覆膜保持湿度，5 d～10 d后逐渐揭去塑料膜。移栽后第2 d和第7 d分别施全营养叶面肥，在施肥