曲妥珠单抗对SW-620人结肠癌细胞增殖.PDF

中国普外基础与临床杂志 2018 年12 月第25 卷第12 期 • 1 •   ·论　著 · 曲妥珠单抗对 SW-620 人结肠癌细胞增殖 凋亡的影响及其与奥沙利铂协同作用的研究 1 1 2 1 1 王建 ，安华松，宋正霞，何跃君，郭贞 1. 徐州矿务集团总医院普通外科（江苏徐州  221006 ） 2. 徐州矿务集团总医院感染性疾病科（江苏徐州  221006 ） 【摘要】   目的    观察不同浓度曲妥珠单抗单独或联合奥沙利铂对 SW-620 人结肠癌细胞增殖、凋亡及细胞 周期的影响，并探讨其作用机制。 方法     体外培养 SW-620 人结肠癌细胞。① 细胞增殖实验：将细胞分为 2 个 大组：曲妥珠单抗组和曲妥珠单抗+奥沙利铂组，每个大组内设 8 个浓度小组（每个小组设 5 个复孔），曲妥珠单 抗组的浓度依次为 0、0.001、0.01、0.1、1、10、100 及 1 000 μg/mL ，对应的曲妥珠单抗+奥沙利铂组曲妥珠单抗的浓 度与前相同，不同之处在于均加入了奥沙利铂（10 μmol/L）。采用 CCK-8 法检测各组细胞的吸光度（OD ）值。② 细胞凋亡实验：组别设置同增殖实验，只是曲妥珠单抗的浓度仅包括 0、0.1、1 及 10 μg/mL 。采用流式细胞仪检 测各组细胞的细胞凋亡率及细胞周期分布。③ her-2 蛋白表达检测：分别以 0 、100 及 1 000 μg/mL 曲妥珠单抗， 以及 0、1 及 10 μg/mL 曲妥珠单抗联合奥沙利铂（10 μmol/L）处理 SW-620 细胞，采用 Western blot 法检测各细胞 中 her-2 蛋白的表达。 结果    ① 细胞增殖实验：同种浓度下曲妥珠单抗+奥沙利铂组的 OD 值均低于曲妥珠单抗 组（P0.05），且随着曲妥珠单抗浓度的增加，OD 值在逐渐降低。② 细胞凋亡实验：同种曲妥珠单抗浓度下，曲 妥珠单抗组+奥沙利铂组的细胞凋亡率均较曲妥珠单抗组高（P0.05）。流式细胞检测：不同浓度曲妥珠单抗+奥 沙利铂处理后，随浓度增加，G 期细胞比例呈下降趋势，S 期细胞比例呈上升趋势，且呈剂量依赖性；至 1 μg/mL 1 和 10 μg/mL 时，与 0 μg/mL 时比较，前者的 G 期细胞比例较低，S 期细胞比例较高（P 0.05 ）；在 0.1 、1 和 10 1 μg/mL 浓度的曲妥珠单抗条件下，曲妥珠单抗联合奥沙利铂组的 G 期细胞比例较曲妥珠单抗单药组升高 2 （P0.01）。③ her-2 蛋白的表达水平：1、100 及 1 000 μg/mL 曲妥珠单抗组细胞中 her-2 蛋白的表达水平逐渐降 低，3 组间两两比较差异均有统计学意义（P0.05）；0、1 及 10 μg/mL 曲妥珠单抗+奥沙利铂组中 her-2 蛋白的表 达水平也逐渐降低，3 组间两两比较差异也有统计学意义（P0.05）。 结论    高浓度曲妥珠单抗可抑制 SW620 人 结肠癌细胞的增殖，诱导其凋亡。曲妥珠单抗和奥沙利铂具有协同抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用。 【关键词】  结肠癌；曲妥珠单抗；奥沙利铂；her-2 蛋白；SW-620 细胞；体外实验 Effect of trastuzumab on proliferation and apoptosis of SW-620 human colo