小鼠嗅鞘细胞的分离纯化和免疫细胞化学特性.pdf

维普资讯 大理学院学报 第6卷 第8期2007年8月 J0URNALOFDALIUNIVEllSITY Vo1．6 No．8 Aug．2007 小鼠嗅鞘细胞的分离、纯化和免疫细胞化学特性 赵 楠 ，盛潇磊。，庞江霞 ，冯忠堂 (1．昆明医学院神经科学研究所，云南昆明 650031；2．昆明市第一人民医院神经外科， 云南昆明 650011；3．云南省第二人民医院神经内科，云南昆明 650021) [摘要]目的：对小鼠嗅鞘细胞的体外分离、纯化和免疫细胞化学特性进行研究。方法：分离新生小鼠嗅鞘细 胞，综合运用差速贴壁法、阿糖胞苷抑制和丝裂原刺激等方法对其进行纯化，并用免疫细胞化学方法对其进 行检测。结果：体外培养的新生小鼠嗅鞘细胞主要为双极或三极细胞。纯化培养后其纯度可以达到88．7％以 上，污染细胞中有星形胶质细胞、神经元、少突胶质细胞和成纤维细胞。免疫组化结果提示，嗅鞘细胞呈P75 和CNP免疫阳性，GFAP和Nestin阴性。结论：本研究对新生小鼠嗅鞘细胞的形态学和免疫细胞化学特性提供 了部分数据。但不同的取材时间，不同的培养条件对嗅鞘细胞的影响尚需进一步研究。 [关键词]嗅鞘细胞；细胞培养；阿糖胞苷；丝裂原；免疫细胞化学 [中图分类号]R392 [文献标识码]A [文章编号]1672—2345(2007)08—0013—04 Isolation，purificationandimmunocytochemicalcharacterizationofolfactoryensheathingcellsinmice ZHAONan一，SHENGXiao—lei，PANGJiang-xia’，FENGZhong—tang (1．InstituteofNeuroscience，KunmingMedicalCollege，Kunming，Yunnan650031，China；2．Dept．ofNeurosurgery， KunmingFirstPeople’SHospital，Kunming，Yunnan650011，China；3．Dept．ofNeurology，the2ndPeople’sHospital ofYunnanProvince，Kunming，Yunnan650021，China) [AbstractJObjective：|r0investigatetheisolation，purificationandimmunocytochemicalcharacterizationofolfactoryensheathing cells (OECs)inmice．Methods：OECswereisolatedfrom postnatalICRmice．TheprimarilyculturedOECswerepurifiedwiththe method ofattachment，arabinosideandbFGF，andOECswasanalyzedbymeansofimmunocytochemistry．Results：MostOECsare bipolarortripolra．Th epurityofOECswasestimatedtobeover88．7％．Th enon—OECscellconsistsofastrocytes。neurons。oligoden— drocytesandfibroblas．Positive stainingofP75 and CNP wasobserved in OECsby immunocytochemistry．butnotinGFAP and Nestin．Conclusions：Th epartialdatum ofmorpholoyg andimmunocytochemistryofOECswereprocuredinthisstudy．Butitn