蛋白质的纯化与鉴定.pdfVIP

Advanced Biochemistry Fall 2015 Protein Separation and Purification 蛋白质分离和纯化-I 蛋白质分离纯化的必要性 需要单一的蛋白质研究其结构与功能 化学修饰需要单一的蛋白质 纯化改造过的蛋白质，从而开发出性 能更优良的蛋白质 Lecture Outline 蛋白质的分离纯化的基础 蛋白质的分离纯化原则和程序 蛋白质的含量测定 蛋白质纯度鉴定 蛋白质的分离纯化方法 蛋白质层析技术 蛋白层析的主要技术 10/12/2015 3 第一部分 蛋白质的分离纯化的基础： 结构和特性 蛋白质的结构和特性 1. 酸碱性质 2. 胶体性质 3. 分子量的测定 4. 结构和形状 一、蛋白质的酸碱性质 两性电解质 可解离基团：α-NH3+ α-COO- 侧链上的功能基团 氨基酸有的化学性质蛋白质就有 pI=正负电荷相等，净电荷为零时的pH 水化膜 + － + + 酸 碱 － － － + + 碱 酸 － － + + － － 带正电荷的蛋白质 在等电点的蛋白质 带负电荷的蛋白质 脱水作用 脱水作用 脱水作用 + － + + － + 碱 酸 － － + － + － + + － － 带正电荷的蛋白质 不稳定的蛋白质颗粒 带负电荷的蛋白质 溶液中