小鼠骨髓树突状细胞pcDNAhCEA转染疫苗的抗瘤作用3.PDFVIP

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2019-03-30 发布于天津
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小鼠骨髓树突状细胞pcDNAhCEA转染疫苗的抗瘤作用3.PDF

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中国病理生理杂志　Chinese Journal of Pathophysiology 　2002 ,18 ( 11) :1317 - 1323 ·13 17 · ( ) [文章编号] 　1000 - 4718 2002 11 - 1317 - 07 小鼠骨髓树突状细胞 pcD NA3 - hCEA 转染疫苗的抗瘤作用黄幼田, 　董子明 , 　赵明耀 , 　杨洪艳 , 　张义国 , 　郑智敏 , 　马俊芬 , 　汤黎明 , 　陈　宁 (郑州大学基础医学院病理生理学教研室 ,河南郑州 450052) ( ) ( + ) 　　[摘　要] 　目的: 将 pcDNA3 - hCEA 转染小鼠骨髓树突状细胞 DCs ,观察其诱导BALB/ c 小鼠对 CT26 hCEA 的抗肿瘤免疫效应。方法 :采用 rmGM - CSF 和 rmIL - 4 体外诱导培养小鼠骨髓 DCs ;构建真核表达质粒 pcDNA3 - ( ) ( + ) hCEA ;并用 lipofectamine 将其转染 DCs ,制备 DCs pCDNA3 - hCEA 疫苗 ; 同时制备 CT26 hCEA ;采用 RT - PCR 检测 ( ) ( ) DCs pCDNA3 - hCEA 中CEA mRNA 的表达 ,采用放射免疫法检测DCs pCDNA3 - hCEA 培养上清中CEA 的含量 ;使用 ( ) ( ) DCs pCDNA3 - hCEA 疫苗体外诱导小鼠同种异体 T 淋巴细胞靶向性杀伤。采用 DCs pcDNA3 - hCEA 疫苗预防免疫 ( + ) ( ) BALB/ c 小鼠,观察其对于荷临界致瘤量 CT26 hCEA 小鼠的抗肿瘤效应。结果 :经 G418 筛选 ,DCs pCDNA3 - hCEA 有 14 %的获得率 ;RT - PCR 检测表明 DCs (pCDNA3 - hCEA) 内 CEA mRNA 呈阳性表达 ; 放射免疫法检测表明 DCs ( ) ( ) ( ) pCDNA3 - hCEA 能微量表达人 CEA ; DCs pCDNA3 - hCEA 能够有效诱导 CEA 靶向免疫杀伤。DCs pcDNA3 - hCEA ( + ) 疫苗延长荷 CT26 hCEA 瘤小鼠生存期 1 周至 4 周。结论 :编码肿瘤抗原基因的真核表达质粒转染的树突状细胞 , 能够诱导较强的特异性抗肿瘤免疫效应。