新人教版《酵母菌细胞的固定化》.pptVIP

B、搅拌要彻底充分，使两者混合均匀，以免影响实验结果的观察 （5）固定化酵母细胞 以恒定的速度缓慢的将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中，将形成的凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右 ① 过程 ②注意事项 A、可利用海藻酸钠制成不含酵母菌的凝胶珠，用作对照 B、海藻酸钠胶体在CaCl2这种电解质的作用下，发生聚沉，形成凝胶珠，需稳定30min左右 （三）用固定化酵母细胞发酵 ①将固定化酵母细胞（凝胶珠）用蒸馏水冲洗2－3次，洗去凝胶珠表面多余的电解质溶液 1、过程 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的 ②将150ml质量分数为10％的葡萄糖溶液转移至200ml的锥形瓶中，再加入固定好的酵母细胞，置于25°C下发酵24h 2、注意事项 ①控制好发酵温度，一般是室温25 °C ②发酵时间可视具体情况而定，一般时间稍长一些，效果明显 ③可用不含酵母的凝胶珠做相同的处理，对照实验结果 （一）观察凝胶珠的颜色和形状 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。 （二）观察发酵的葡萄糖溶液 利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多气泡，同时会闻到酒味 课题成果评价 * 第四节 酶工程简介 教学目标： 知识目标 1、酶工程的概念以及有关生产和应用酶制剂的基础知识（A） 2、酶工程与基因工程、细胞工程和发酵工程之间具有相互交叉渗透的关系（A） 能力目标 1、培养学生获取、分析与处理信息的能力 2、培养学生自学能力 情感目标 1、通过发酵工程的相关信息资料的收集，培养学的STS观点 2、通过发酵工程发展的历史的学习，培养学生热爱科学、勇于探索的精神 教学重点： 1、酶制剂的生产和应用 2、生物工程各分支领域之间的密切关系 教学难点： 生产酶制剂的基本原理 教学手段和方法： 多媒体课件；引导自学和讨论 课时安排： 一课时 作业 复习题 酵母细胞的固定化 1、酶制剂的概念和种类 （一）酶制剂 含有酶的制品 ①定义： 多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶 ②种类： A、液体酶制剂 治疗某些胃病的胃蛋白酶液 B、固体酶制剂 2、直接使用酶制剂的不足 ①天然酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活 ②溶液中酶很难回收，不能再次利用，提高了生产成本 ③反应后，酶会混在产物中，影响产品质量，难以在工业生产中广泛应用 （二）固定化酶 固定化酶是指限制或固定于特定空间位置的酶，具体来说，是指经物理或化学方法处理，使酶变成不易随水流失即运动受到限制，而又能发挥催化作用的酶制剂 （三）固定化细胞 将细胞限制或定位于特定空间位置的方法称为细胞固定化技术 被限制或定位于特定空间位置的细胞称为固定化细胞 固定化技术： 固定化细胞： 类型 优点 不足 直接使用酶 催化效率高，低耗能、低污染等 对环境条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；反应后酶会混在产物中，可能影响产品质量 固定化酶 酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用 一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的 固定化细胞 成本低、操作容易、对酶活性的影响更小、可以催化一系列的反应、容易回收 固定后的酶或细胞与反应物不容易接近，可能导致反应效果下降由于大分子物质难以自由通过细胞膜，因此固定化细胞的应用也受到限制 （四）直接使用酶、固定化酶和固定化细胞催化的优缺点 （五）酶和细胞固定化方法 1、物理吸附法： 将酶吸附到固体吸附剂表面的方法，固体吸附剂多为活性碳、多孔玻璃等 2、包埋法 ①定义：将酶包裹在多孔的载体中，包埋成格子型或包埋成微胶囊型 ②载体：明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺 ③种类 凝胶包埋法：将个别酶分子包在高聚物格子中，可以将块状聚合形成的凝胶切成小块，也可以直接包埋在珠状聚合物中，这样作可以使固定化酶机械强度提高10倍，并改进酶脱落的情况 微囊化法：将酶溶液或悬浮液包裹在膜内，膜既可以使酶存在于类似细胞内的环境中，又阻止酶的脱落或直接与微囊外环境接触。小分子底物能迅速通过膜与酶作用，产物也能扩散出来 交联法：通过双功能试剂，将酶和酶联结成网状结构的方法 3、化学结合法： ①定义：将酶分子相互结合，或将其结合到纤维素、琼脂糖，离子交换树脂等载体上的固