基因敲除技术及其进展.docxVIP

PAGE 基因敲除技术研究进展及其在代谢工程上的应用 The Current Status of Gene Knockout and its Application in Metabolic Engineering 天津大学化工学院 二零壹六年六月 摘 要 基因敲除技术是20世纪80年代发展起来一项重要的分子生物学技术，在微生物代谢工程，动植物改造以及功能基因研究方面具有广泛的应用。本文介绍了基因敲除的策略和在代谢工程中的作用，着重介绍了四种新兴的基因敲除策略：RNAi，ZFN，TALENs以及最近研究火热的CRISPR/Cas9。并在最后展望了基因敲除技术尤其是新兴技术在相关领域的发展趋势，为基因敲除技术的进一步发展提供了参考。 关键词： 基因敲除 代谢工程 同源重组 CRISPR/Cas9 ABSTRACT Gene Knockout is an important molecular biotechnology which has developed sine 1980. It has been proved efficient in microbial metabolic engineering, transform of nimals and plants and functional genomics. In this review, we mainly introduced the strategies of gene knockout and its application in metabolic engineering.And four new strategies RNAi, ZFN, TALENs and CRISPR/Cas9 were highlighted in detail. At last, developing frontiers and application prospects of gene knockout were further discussed. KEY WORDS：gene knockout, metabolic engineering, homologous recombination, CRISPR/Cas9 目 录 MACROBUTTON InsertCrossReference TOC \o 1-3 \h \z \u HYPERLINK \l _Toc454120557 第一章 基因敲除技术 PAGEREF _Toc454120557 \h 1 HYPERLINK \l _Toc454120558 1.1基因敲除相关背景 PAGEREF _Toc454120558 \h 1 HYPERLINK \l _Toc454120559 1.2基因敲除技术在代谢工程中的应用 PAGEREF _Toc454120559 \h 2 HYPERLINK \l _Toc454120560 第二章 基因敲除策略 PAGEREF _Toc454120560 \h 3 HYPERLINK \l _Toc454120561 2.1传统的基因敲除策略 PAGEREF _Toc454120561 \h 3 HYPERLINK \l _Toc454120562 2.1.1利用同源重组进行基因敲除 PAGEREF _Toc454120562 \h 3 HYPERLINK \l _Toc454120563 2.1.2利用随机插入突变进行基因敲除 PAGEREF _Toc454120563 \h 4 HYPERLINK \l _Toc454120564 2.2新兴的基因敲除策略 PAGEREF _Toc454120564 \h 5 HYPERLINK \l _Toc454120565 2.2.1 利用RNA干扰引起的基因敲除 PAGEREF _Toc454120565 \h 5 HYPERLINK \l _Toc454120566 2.2.2 锌指核酸酶基因打靶技术 PAGEREF _Toc454120566 \h 5 HYPERLINK \l _Toc454120567 2.2.3 TALENs 靶向基因敲除技术 PAGEREF _Toc454120567 \h 6 HYPERLINK \l _Toc454120568 2.2.4 CRISPR/CAS9基因敲除技术 PAGEREF _Toc454120568 \h 7 HYPERLINK \l _Toc454120569 第三章 前景展望 PAGEREF _Toc454120569 \h 9 HYPERLINK \l _Toc454120570 参考文献 PAGEREF