基于网络药理学方法研究乌头汤治疗类风湿关节炎的作用机理-中药学专业论文.docx

西南交通大学硕士学位论文主要工作(贡献)声明本人在学位论文中所做的主要工作或贡献如下： 西南交通大学硕士学位论文主要工作(贡献)声明 本人在学位论文中所做的主要工作或贡献如下： 1．本研究利用在线数据库TCM DatabaSe@Taiwall查找得到乌头汤的化学成分共 174个(制川乌8个、麻黄47个、黄芪22个、白芍15个、炙甘草82个)，在PubChem 中查找得到乌头汤的人源靶蛋白共186个(制川乌1个、麻黄119个、黄芪11个、白 芍7个、炙甘草48个)，在GenBank中查找得到与类风湿关节炎(Rheumatoid Ardlritis， RA)相关的人源基因共831个。通过生物信息分析平台Ingenuity Pa_吐1way Analysis(IPA) 共构建出12个乌头汤的分子网络和25个RA疾病分子网络。通过分析乌头汤靶蛋白 和RA相关基因共同调节的生物功能得出乌头汤可能通过调节炎症响应、造血系统的 发展与功能、细胞与细胞问的信号交流等生命活动实现治疗RA的作用。另外，得到 乌头汤靶蛋白参与的346条信号通路和RA相关基因参与的394条信号通路，其中有 314条信号通路是乌头汤靶蛋白和RA相关基因共同参与的，这些共同参与的信号通路 中与细胞免疫和细胞因子信号相关的前10位信号通路分别是：(1)CCR5 Signaling in Macrophages；(2)Pr01actiIl Signalillg；(3)Calcium—induced T L)恤phocyte Apoptosis； (4)IL-8 Signaling；(5)fMLP Si印aling iIl NeunDpllils：(6)Na自瑚】鼬1ler CeU Si印aliIlg： (7)NF—KB A撕Vation byⅥmses；(8)IL一12 sigIlaling aJld Production in Macmphages； (9)FcY R-eceptor-mediated Phagocytosis iIl Macrophages aIld Monoc”es；(1 0)Leul(oc”e ExstIIaVasation Signaling。本研究重点关注排在第一位的CCR5 Signaling in Macrophages， 该信号通路与炎症响应有关，能调节趋化因子和前炎症介质的表达。 2．本研究通过细胞实验证实乌头汤能抑制MIP．1B刺激的U937细胞中趋化因子 ＆气NTES的分泌以及pkc 6和p38的磷酸化水平。 3．本研究通过动物实验证实乌头汤能有效缓解胶原诱导关节炎(Collagen Induced ALmlritis，C认)大鼠的关节肿胀程度，抑制cIA大鼠血清中趋化因子MIP．1Q、MIP．2、 ＆～NTES、IP—lO和MCP一1的表达，降低CIA大鼠踝关节中趋化因子MIP一1a、RANTES 和IP一10的mRNA的相对表达量以及CCR5、p-pkc 6和p—p38的蛋白水平。 综上所述，本研究结合网络药理学分析和实验验证一方面证实了乌头汤对胶原诱 导关节炎有一定治疗作用，另一方面发现乌头汤发挥治疗作用可能与调节CCR5 Signaling in Macrophages信号通路中pkc 6和p38的磷酸化以及趋化因子的产生有关。 万方数据 本研究为乌头汤治疗RA作用机制的阐明提供了一定的理论和实验依据。本人郑重声明：所呈交的学位论文，是在导师指导下独立进行研究工作所得的成 本研究为乌头汤治疗RA作用机制的阐明提供了一定的理论和实验依据。 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是在导师指导下独立进行研究工作所得的成 果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰 写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中作了明确说明。 本人完全了解违反上述声明所引起的一切法律责任将由本人承担。 学位论文作者签名：却晴啃 日期：沙／1．，．协 万方数据 西南交通大学硕士研究生学位论文 西南交通大学硕士研究生学位论文 第1页 摘要 目的： 本研究旨在应用网络药理学方法探索乌头汤治疗类风湿关节炎(Rheumatoid A讪ritis，RA)的作用机制并通过实验进一步验证。 方法： 1．采用网络药理学方法对乌头汤(Wu—Tou Decoction，WTD)治疗类风湿关节炎 的潜在作用机制进行分析，具体步骤如下：首先，在台湾中医药资料库(Traditional cmnese Medicine DatabaSe@1苟wan，TcM D a．tabaLse@Taiwall)检索乌头汤各组分中 药含有的化学成分，在PubChem中检索与这些化学成分相互作用的靶蛋白，在GeIlBaIlk 数据库中检索与RA相