基因工程在食品科学中的应用.pptVIP

* * * * * * * * * （三）超氧化物歧化酶(SOD)的基因工程 采用基因工程手段改良产酶菌株，近年来应用于超氧化物歧化酶(SOD)。Hallewell等报道了人的SOD的cDNA的核苷酸序列、分子克隆和用Tacl启动子在大肠杆菌中的高效表达。利用酵母甘油醛磷酸脱氢酶启动子指导人的SOD基因在酵母菌中高效表达，产生的人的SOD是可溶的，酶比活正常。酵母产生的人的SOD在其N—末端乙酰化，它与人红细胞的SOD物化特性相同。可见，用酵母表达生产人的SOD，具有广泛的应用前景。 （四）应用于生产保健食品的有效成分 当今，保健食品的发展有赖于基因工程这门新技术。现在，可以采用转基因手段，在动植物或其细胞中使目的基因得到表达而制造有益于人类健康的保健成分或有效因子。 例如，将一种有助于心脏病患者血液凝结溶血作用的酶基因克隆至牛或羊，便可以在牛乳或羊乳中产生这种酶。又如，把人的血红素基因克隆至猪中，那么，猪血可以用做人类血液的代用品。这些都是转基因动物生产特殊成分的例子。 思考题 1. 什么是基因工程？基因工程的操作步骤有哪些？ 2. 基因工程常用的工具酶有哪些？什么是限制性内切酶？ 3. 什么是基因工程的载体？理想载体应具有哪些特征？常用的载体有哪些？ 4. 什么叫目的基因？ 获得目的基因的方法有哪些？目的基因与载体的连接方式有哪些？ 5.说明重组DNA分子导入受体细胞的方法。 6.基因工程中常用的分子生物学方法有哪些？ 7. 试述基因工程在食品工业上的应用。 1.什么是基因工程？基因工程的操作步骤有哪些？ 从狭义上讲：基因工程又称DNA重组技术，是指将一种或多种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入到另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿遗传并表达出新的性状。 从广义上讲：基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与应用，包括上游技术和下游技术两大组成部分。 上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建（即重组DNA技术）。 下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。 基因工程的实现主要分为五个步骤： 制备目的基因（切）； 将目的基因与载体连接，构建重组DNA（接）； 将重组DNA导入受体生物细胞（转）； 筛选具有重组DNA的转化体阳性克隆（增）； 使目的基因在受体生物细胞中高效表达（检）。 2. 基因工程常用的工具酶有哪些？什么是限制性内切酶？ 目前，常用的工具酶已有300多种。主要包括限制性内切酶、DNA甲基化酶、聚合酶、连接酶、激酶、磷酸化酶和核酸酶等。 限制性核酸内切酶，简称限制酶。能够识别DNA大分子双链上特定的核苷酸顺序，并能在某一特定部位将DNA断裂。 3. 什么是基因工程的载体？理想载体应具有哪些特征？常用的载体有哪些？ 载体：将外源DNA携带进入宿主细胞的工具。 基因载体必须具备的特征条件： 对受体细胞的可转移性。 具有与特定受体细胞相适应的复制位点或 整合位点。 具有多种单一的核酸酶识别位点。 具有合适的选择标记。 分子量较小，多拷贝。 常用的载体有：质粒载体；噬菌体载体；柯斯（粘粒）质粒；酵母载体；农杆菌质粒载体；人工构建的大容量载体等。 4. 什么叫目的基因？ 获得目的基因的方法有哪些？ 目的基因与载体的连接方式有哪些？ 目的基因(objective gene)：又叫靶基因(target gene)，是指根据基因工程的目的，设计的所需要的某些DNA分子片段，它含有一种或几种遗传信息的全套密码(code) 。 常用方法有： 直接分离DNA 鸟枪法 基因文库法 酶法或化学方法人工合成基因 mRNA差异显示技术筛选差异表达基因 差异蛋白质谱表达技术筛选功能基因 连接方法：粘性末端连接；平头末端连接；人工接头法；同源多聚尾连接法。 5. 说明重组DNA分子导入受体细胞的方法。 转化 转染 微注射技术 电转化法 基因枪技术 病毒感染法 农杆菌质粒介导法 6.基因工程中常用的分子生物学方法有哪些？ （1）凝胶电泳技术 琼脂糖凝胶电泳；聚丙烯酰胺凝胶电泳 （2）杂交技术 核酸原位杂交 菌落原位杂交 斑点狭缝杂交 膜上吸印杂交 （3）PCR技术 7. 试述基因工程在食品工业上的应用 （1）利用基因工程改善食品原料的品质 改良动物食品性状 改造植物性食品原料 改造食品微生物 培育高抗的新品种 （2）利用基因工程改进食品生产工艺 改进果糖和乙醇生产方法 改良啤酒大麦的加工工艺 改良小麦种子贮藏蛋白的烘烤特性 改善牛乳加工特性 （3）利用基因工程生产食品添加剂及功能性