体外受精与胚胎培养.pptxVIP

体外受精与胚胎培养受精的概念受精是两性配子（卵母细胞和精子）相融合形成一个新的细胞—合子的过程。它标志着胚胎发育的开始，是一个具有双亲遗传特征的新生命的起点。受精的过程1.精子穿过卵母细胞外层的颗粒细胞2.精子结合并穿透卵母细胞的透明带3.精卵融合4.卵子激活5.精子激活6.原核形成精子入卵的过程受精过程中涉及的反应1.顶体反应：精子质膜与顶体外膜之间发生点状融合，并释放出顶体酶的过程。顶体酶有很强的消化和水解蛋白的作用，从而使精子顺利的穿过透明带。2.皮质反应：精子接触卵黄膜后，皮质颗粒膜与卵黄膜发生融合，皮质颗粒中物质被释放到卵黄膜与透明代之间的卵周隙中。皮质反应引发了以下两个子反应（防止多精入卵机理）：透明带反应：皮质颗粒中的类胰蛋白酶作用于透明带，使透明带发生改变，从而是其它精子不能再穿过他。卵质膜反应：由于皮质反应结果，卵质膜补充了皮质颗粒膜而发生了重组，重组后的卵黄膜可以防止其余精子入卵。原核期胚胎的质量评估体外授精后16~18 h, 此时合子处于原核期1.Scott 提出的“合子评分系统”，其根据核仁数目和分布以及原核形态将其分为4级Z1:2PN并列相连, 大小一致; 核仁大小、数目相同, 线性排列于原核连接处; 核仁数量为3~7个。Z2: 2PN并列相连, 大小一致; 核仁大小、数目相同, 分散排列于原核中; 核仁数量为3~7个。Z3: 2PN并列相连, 大小一致; 核仁数目相同或不同, 大小均匀或不均匀; 其中一个原核中核仁呈线性排列于原核连接处, 而另一个原核中, 核仁分散不规则; 核仁数量为3~7个。Z4: PN大小不等或分离。按照此方法评分, Z1、Z2级合子通常会发育为较优质的胚胎, 移植此类胚胎会得到较高的妊娠率; Z3级合子发育为低质胚胎, 种植潜力低下; Z4级合子通常预示之后的胚胎染色体异常, 一般不用于移植。2.Tesarik提出的“原核评分系统，其根据原核形态与胚胎发育的相关性将合子分为6型0. 每个原核核仁数目大于3个，两个原核核仁数目相差小于3，核仁在原核内的排列方式一样1. 两个原核核仁数目相差大于32. 两个原核中至少有一个原核核仁数目小于7，且核仁散在排列3. 两个原核中至少有一个核仁数目大于7，且核仁均为极性排列4. 两个原核中至少有一个核仁数目小于35. 两个原核核仁排列方式不一致其中0型代表正常合子, 1~5型代表各种不规则形态的合子，且0型合子的临床妊娠率高于非0型合子的临床妊娠率。异常受精的类型1.单原核2.未见原核3.多原核（多精受精）通常异常受精的核子很难发育到囊胚，经常在卵裂期发生阻滞。卵裂及囊胚形成卵裂：受精卵经过多次连续迅速的细胞分裂，形成许多小细胞的发育过程。每次卵裂产生的子细胞称卵裂球。卵裂的主要特点：细胞周期短，细胞分裂间期（G1期）非常短甚至没有；每次卵裂，核物质重新合成增长，细胞质没有增长，但其理化性质发生变化，因而卵裂球几乎不生长即迅速地进行下次分裂，卵裂球体积越来越小，一旦核质比例达到平衡，细胞分裂速度开始减慢。卵裂后形成的大量小细胞，是便于以后形态发生中细胞的重排、胚层和器官原基的形成和胚体体形的塑造。卵裂的过程卵裂率容易受到培养环境的影响, 一般认为在一个稳定的培养条件下, 受精后第1日应达到2细胞期, 第2日应达到4~6细胞期, 第3日达到7~9-细胞期，第5日形成囊胚。发育迟缓或生长过快的胚胎种植率通常很低。我们通常采用第3-5天的胚胎进行移植。卵裂类型1.根据卵裂球的数目是否按几何基数增加，分为同时卵裂和异时卵裂。哺乳动物（包括人类）的受精卵从一开始就是异时卵裂。异时卵裂导致出现了我们常见的3细胞、5细胞、7细胞胚胎。2.根据卵黄的含量和分布，分为等分全裂、不等全裂以及不全裂。由于哺乳动物几乎不含有卵黄，其卵裂方式为等分全裂。哺乳动物卵裂的特点(1)哺乳动物旋转型全卵裂：第1次为经线裂，其后的2个卵裂球各采不同的卵裂方式。(2)早期卵裂球的卵裂不同步，可产生奇数细胞的胚胎。(3)卵裂速度缓慢。D3（8细胞）胚胎的质量评估1、胚胎发育速度2、胚胎中卵裂球的形态卵裂球的形态是指胚胎中每个细胞的大小是否一致、形状是否相似。优先挑选大小和形状一致差异非常小的胚胎，这些胚胎受孕的几率较大。3、胚胎中碎片的多少胚胎的碎片是胚胎发育过程中产生的“废物”，一般认为与胚胎的质量及发育潜能有关。通常认为碎片体积少于胚胎体积5%的胚胎是最美的，也称为优质胚胎，25%以下是可以用的，称为有效胚胎，碎片体积大于50%的胚胎一般会被淘汰。胚胎经过三天的发育，部分用于移植或冷冻。胚胎发育是一个复杂的动态过程, 应结合从取卵到移植各时期的胚胎评分情况, 建立连续的胚胎评分体系, 以选出合适的胚胎进行移植。通过记录胚胎的细胞数，胚胎细胞球的均匀程度，胚胎碎片，以及胚胎是