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第四章 本章学习提示 第一节 微生物的六类营养要素 一、碳源(carbon source） 二、氮源(nitrogen source) 三、能源(energy source) 四、生长因子（growth factor） 五、无机盐（mineral salts） 六、水（water） 第二节 微生物的营养类型 二、微生物的营养类型 光能自养微生物（光能无机营养型）　 化能自养微生物（化能无机营养型） 光能异养微生物（光能有机营养型） 化能异养微生物（化能有机营养型） 第三节 营养物质进入细胞的方式 一、单纯扩散(simple diffusion) 二、促进扩散(facilitated diffusion) 3、促进扩散特点 三、主动运输(active transport) 2、主要运输的物质 四、基团移位(group translocation) 2、磷酸转移酶系统（PTS） （3）总反应式 四种运送营养物质方式的主要区别 第四节 培养基 2、四种方法 二、培养基的种类 2、按培养基的物理状态分 琼 脂 3、按培养基的功能分 培养基成分分析 培养基的配方如下： ①K2HPO41g，MgSO4·7H2O 0.2g，NaCl0.1g，CaCl20.1g，FeCl3 0.02g，(NH4)2SO41g，苯酚6.6g，蒸馏水1000ml。pH 7.2～7.5 ②硫磺10g，CaCO3 10g，K2HPO4 1g，NH4NO3 1g，MgSO4·7H2O 0.5g，蒸馏水1000ml。 ③甘露醇2%，K2HPO40.1%，MgSO4·7H2O 0.02%，FeCl3·6H2O 0.025%，Na2MoO4·2H2O 0.05%，CaSO4·2H2O 0.01%，CaCO3 0.05%。pH7.3～7.6 ④蛋白胨10g，乳糖5g，蔗糖5g，K2HPO42g，伊红0.4g，美蓝65mg，琼脂20g，蒸馏水1000ml。pH7.2 （1）分析该培养基各成分的主要作用。 （2）该培养基适合于哪类微生物的培养？为什么？ （3）按照以下方法分类，该培养基分别属于哪类培养基？ 1）对培养基成分的了解程度。 2）培养基的物理状态。 3）培养基的功能和用途。 EMB（伊红-美兰培养基） 大量元素：生长所需浓度在10-3～10-4mol/L的元素。 无机盐主要为微生物提供除碳、氮源以外的各种重要元素。 微量元素：生长所需浓度在10-6～10- 8mol/L的元素。 ☆配制培养基时，针对大量元素加入的试剂首选K2HPO4及MgSO4（提供四种需要量最大的元素）；需要量少的元素一般不必另行加入，因为在一般试剂、水、器皿或其他天然成分中都以杂质等状态存在。但若配制研究营养代谢等的精细培养基，所用的玻璃器皿是硬质的，试剂是高纯度的，必要的微量元素需要一一加入。 无机盐的生理功能： 构成细胞组分；调节细胞渗透压、pH值和氧化还原电位；作为化能自养菌的能源（S0、Fe2+等）或无氧呼吸的氢受体（NO3-、SO42-等）；构成酶活性基团的组分，维持酶的活性。 Q：培养基配方中没有反映出的元素是否都是微生物生长不需要的？ 1、水的功能 2、微生物细胞的含水量 微生物营养细胞含水量约占细胞鲜重的70~90％。 含水量：营养体﹥孢子﹥细菌芽孢 细胞中生化反应的良好介质；调节细胞温度；维持细胞的膨压；直接参与代谢反应（如蓝细菌能利用水中的氢作为还原CO2时的还原剂）。 3、水分活度（aw，water activity） 水活度：是指在同温同压下，溶液中水的蒸汽压和纯水蒸汽压的比值。即：aw=P溶液/P纯水。它代表了微生物实际可利用的自由水的含量。 微生物正常生长所需的水活度通常在0.60～0.998之间。细菌要求的水活度较高，霉菌、酵母菌次之，耐旱微生物要求的水活度最低（接近0.6）。 Q：环境中的含水量越高，是否意味微生物可利用的水分越多？对培养基的配制有何指导意义？ 一、营养类型的常见划分方法 按能源分 按碳源分 按氢供体分 光能营养型：以光能作为能源。 自养型：以CO2作为主要或唯一碳源。 无机营养型：还原CO2合成细胞物质的氢供体是还原性无机物。 化能营养型：以化学能(物质氧化释放的能量)作为能源。 异养型：必需以有机物作为主要或唯一碳源。 有机营养型：合成细胞物质的氢供体是有机物。 营养类型的划分是人为的，各种营养类型之间往往存在着中间过渡类型。 红螺菌既可利用光能，也可在黑暗下生长。 氢单胞菌是异养和自养的过渡型（兼性自养） 基本碳源 营养类型 能源 氢供体 微生物类群 光能自养型 光能 无机营养型 光能异养型 （光能有机营养型）