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遗传物质存在的部位 核苷酸水平 核糖核酸和脱氧核糖核酸 基因水平 基因是生物体内具有自主复制能力的最小遗传功能单位,其物质基础是一条以直线排列、具有特定核苷酸序列的核酸片段。 基因组是指存在于细胞或病毒中的所有基因。由于现在发现许多非编码序列具有重要的功能,因此目前基因组的含义实际上是指细胞中基因以及非基因的DNA序列组成的总称,包括编码蛋白质的结构基因、调控序列以及目前功能还尚不清楚的DNA序列。 原核生物基因的组成 原核生物基因的特点 遗传信息的连续性 功能相关的结构基因组成操纵子结构 结构基因的单拷贝及rRNA基因的多拷贝 基因组的重复序列少而短 真核生物的基因的特点 基因的不连续性:内含子、外显子。 高度拷贝和重复顺序 :遗传丰余 。 转录和转译在细胞中有空间分隔 。 原核生物的质粒 质粒的概念: 游离于原核生物基因组以外,具有独立复制能力的小型共价闭合环状的dsDNA分子,即cccDNA。 质粒赋予细菌某些对其生存并非必不可少的特殊功能。 如:产毒、抗药、产特殊酶、降解有毒化合物等 质粒的主要类型 典型质粒简介 F质粒: 大肠杆菌等部分细菌内存在,决定其性别并具有转移能力的质粒。 R质粒: 表现为对抗生素等药物的抗性。 Col质粒: 细菌素的概念 第二节 基因突变和诱变育种 基因突变(gene mutation) 基因突变的类型 突变率(mutation rate) 细胞在每一世代中发生某一性状突变的几率。 某一基因的突变一般是独立发生的,他的突变率不影响其他基因的突变。 通常突变发生的几率为10-6~10-9 基因突变的特点 基因突变自发性和不对应性的证明 1.Luria等的变量实验(fluctuation test) 2.Newcomb的涂布实验 3.Lederberg等的影印平板法(replica plating) 基因突变及其机制 紫外线对DNA的损伤及其修复 UV导致遗传物质产生嘧啶二聚体(TT、TC、CC),造成局部DNA分子无法配对,引起微生物的死亡或突变。 一般微生物具有光复活作用。 在利用UV进行诱变育种等工作时,应在红光灯下进行照射和后继操作,并放置在黑暗条件下培养。 突变与育种 一、自发突变与育种 (breeding by spontaneous mutation) 1.从生产中育种。 仔细观察,做“伯乐” 2.定向培育优良菌株。 卡介苗(BCG vaccine):Bacillus Calmette-Guerin 诱变育种(breeding by induced mutation) 诱变育种是指利用物理、化学等诱变剂处理均匀而分散的微生物细胞群,在促进其突变率显著提高的基础上,采用简便、快速和高效的筛选方法,从中挑选出少数符合目的的突变株,以供科学试验和生产实践使用。 诱变育种的几个原则 诱变育种的几个基本原则 诱变育种的几个基本原则 诱变育种的几个基本原则 诱变育种的几个基本原则 3类突变株的筛选方法 补充培养基:CM 例如:在M9培养基中添加L-His等 只能满足相应的营养缺陷型突变株 生长需要的组合或半组合培养基。 3类遗传个体: 野生型:MM、CM、SM均能生长 营养缺陷型:CM、SM能生长 原养型:MM、CM、SM均能生长 营养缺陷型的表示方法: 基因型: 所需营养物的前三个英文小写斜体字母表示:hisC (组氨酸缺陷型,其中的大写字母C同一表型中不同基因的突变) 表型: 同上,但第一个字母大写,且不用斜体:HisC 在具体使用时多用hisC-和hisC+,分别表示缺陷型和野生型。 突变株的表型 选择性突变株 (selectable mutant) 非选择性突变株 ( non-selectable mutant ) 营养缺陷型 抗性突变型 条件致死突变型 形态突变型 抗原突变型 产量突变型 1.自发性。 2.不对应性 细胞可自发的产生突变 突变性状与引起突变的原因间无直接对应关系 3.稀有性 突变几率为10-6~10-9 4.独立性 5.可诱变性 诱变剂的使用可大大提高突变几率 6.稳定性 7.可逆性 正向突变/回复突变 变量实验(fluctuation analysis)Salvador Luria and Max Delbruck(1943) Salvador Luria Max Delbruck The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1969 Newcombe的涂布实验(1949) 影印实验(replica plating )Joshua Lederberg and Esther Lederberg(1952) Joshua Lederberg J.
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