丝裂素活化蛋白激酶途径在缺氧复合烧伤血清致-中华危重病急救医学.PDF

维普资讯 ·15O · 中国危重病急救医学2 生 月筮 !鲞蔓 塑 尘 ! !： !!!：!：!： · 论 著 · 丝裂素活化蛋白激酶途径在缺氧复合烧伤血清致 心肌细胞损伤中的作用 张家平 黄跃生 杨宗城 【摘要】 目的 观察缺氧复合烧伤血清对心肌细胞丝裂素活化蛋白激酶 (MAPKs)活化的影响，探讨 MAPKs信号途径在缺氧复合烧伤血清致心肌细胞损伤中的作用。方法 乳 鼠心肌细胞原代培养，缺氧复合 烧伤血清作用心肌细胞后不同时间点用免疫印迹化学发光法检测 p38激酶、细胞外信号调节激酶 (ERK)和 c—Jun氨基末端蛋白激酶 (JNK)磷酸化程度；分别用 p38激酶特异抑制剂 SB203580和 ERK特异抑制剂 PD98059抑制 p38激酶和 ERK途径，观察其对缺氧复合烧伤血清培养条件下心肌细胞活性和培养上清中乳 酸脱氢酶 (LDH)含量的影响。结果 心肌细胞p38激酶和ERK在缺氧复合烧伤血清作用后迅速、持续活化， 而JNK活化不明显。用SB203580抑制 p38激酶可显著减少细胞LDH漏出(各时间点P0．05或P0．01) 和改善细胞活性 (双因素作用 12h后，两者间比较，P均O．01)；相反，抑制ERK途径在一定程度上增加了 细胞 LDH漏出和降低细胞活性 (双因素作用 6h和 12h，两者间比较，P均O．01)。结论 心肌细胞MAPKs 的 3条信号转导途径中，p38激酶途径和ERK途径介导了缺氧复合烧伤血清刺激信号的胞 内转导 。其中p38 激酶途径激活介导了心肌细胞的损伤效应，而ERK途径激活则有一定的细胞保护作用。 【关键词】 心肌细胞 ； 丝裂素活化蛋白激酶 ； 缺氧； 烧伤血清 Roleofmitogen—activatedproteinkinasessignalpathwayincardiomyocyteinjuryinducedbyserum after hypoxiaandburninjury zHANG Jia—ping HUANG Yue—sheng，YANG Zong—cheng．StateKey LaboratoryofTrauma，BurnsandCombinedInjury。InstituteofBurns，SouthwestHospital，ThlrdMilitary M edicalUniversity，Chongqing 400038，China Correspondingauthor：HUANG Yue—sheng [Abstract] 0bjective Toobservetheactivationandexploretheroleofthreemajormitogen—activated proteinkinases(MAPKs)，includingextracelluarsignal—regulatedkinase (ERK)，p38kinaseandC—Jun NH2一terminalproteinkinase (JNK)，incardiomyocytesinjuryinducedbyserum afterhypoxiaandburnin— jury．Methods PhosphorylationofthethreemajorMAPKsinprimaryculturedneonatalratcardiomyocytes weredeterminedbyW esternblotting．Contentsofreleasedlactatedehydrogenases (LDH)anddeath—rateof myocytestreatedwithserum afterhypoxiaandburninjury。SB203580+hypoxiaandburnserum，PD98059+ hypoxia and burn serum were observed respectively．Results Exposing ratneonatalcardiomyocytestO hypoxiaandburnserum resultedinarapidandprolongedactivationofp38kinaseandERK．Phosphorylation degreeofp38kinase．ERK1／zwasincreased．Myoc