水牛Sohlh2基因的克隆分析探究及其表达.pdfVIP

江苏农业学报（ＪｉａｎｇｓｕＪ．ｏｆ Ａｇｒ．Ｓｃｉ．），２０１６，３２（２）：３９９～４０７ ｈｔｔｐ：／ ／ ｗｗｗ．ｊｓｎｙｘｂ．ｃｏｍ ３９９ 朱　 鹏，陈集成，陈　 凤，等． 水牛Ｓｏｈｌｈ２基因的克隆分析及其表达［Ｊ］．江苏农业学报，２０１６，３２（２）：３９９⁃４０７． ｄｏｉ：１０．３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１０００⁃４４４０．２０１６．０２．０２５ 水牛Ｓｏｈｌｈ２ 基因的克隆分析及其表达 １，２ １ １ １，３ １ １ １ １ 朱　 鹏 ，　 陈集成 ，　 陈　 凤 ，　 苏　 节 ，　 李海洋 ，　 韦英明 ，　 杨素芳 ，　 石德顺 （１．广西大学亚热带生物资源保护利用国家重点实验室，广西 南宁 ５３０００４； ２．中国农业科学院广西水牛研究所，广西 南宁 ５３０００１； ３．广西医科大学医学科学实验中心，广西 南宁 ５３０００１） 　 　 摘要：　 为阐明广西沼泽型水牛Ｓｏｈｌｈ２基因在水牛不同组织中的表达规律，根据ＧｅｎＢａｎｋ 已公布的牛Ｓｏｈｌｈ２ 基因序列，设计其编码区（ＣＤＳ）扩增引物，应用ＲＴ⁃ＰＣＲ方法扩增克隆获得目的基因片段；应用生物信息学方法，系 统分析了水牛Ｓｏｈｌｈ２ 的遗传进化以及蛋白质的理化性质、二级和三级结构；并应用ＲＴ⁃ＱＰＣＲ技术对Ｓｏｈｌｈ２基因在 水牛组织（器官）的表达进行了分析。 结果表明：水牛Ｓｏｈｌｈ２基因编码区全长 １２８１ｂｐ，共编码４２６个氨基酸。 多 重序列比较分析结果显示水牛Ｓｏｈｌｈ２ 核苷酸序列与牛、绵羊、山羊、猪、马、人和小鼠相应序列的相似性分别为 ９８％、９６％、９６％、８５％、８６％、８１％和７２％，系统进化树显示Ｓｏｈｌｈ２基因在不同物种以及进化的过程中具有高度保守 性。 Ｓｏｈｌｈ２蛋白质呈弱碱性，无信号肽，在细胞中亚定位于细胞核中，存在ｂＨＬＨ结构。 水牛Ｓｏｈｌｈ２基因在水牛垂 体、大脑、肝脏、骨骼、卵巢和睾丸等１１个组织（器官）细胞中具有不同程度的表达，其中睾丸细胞中表达量最高，垂 体和生殖脊细胞中表达量次之，卵丘细胞中表达量低，心脏、肺脏、肌肉细胞和颗粒细胞中不表达。 关键词：　 水牛； Ｓｏｈｌｈ２基因； 克隆分析； 表达 ＋ 中图分类号：　 Ｓ８２３．８ ３　 　 　 文献标识码：　 Ａ　 　 　 文章编号：　 １０００⁃４４４０（２０１６）０２⁃０３９９⁃０９ Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐａｔｔｅｒｎ ｏｆ ｂｕｆｆａｌｏ Ｓｏｈｌｈ２ ｇｅｎｅ １，２ １ １ １，３ １ １ ＺＨＵ Ｐｅｎｇ ，　 ＣＨＥＮ Ｊｉ⁃ｃｈｅｎｇ ，　 ＣＨＥＮ Ｆｅｎｇ ，　 ＳＵ Ｊｉｅ ，　 ＬＩ Ｈａｉ⁃ｙａｎｇ ，　 ＷＥＩ Ｙｉｎｇ⁃ｍｉｎｇ ，　 １ １ ＹＡＮＧ Ｓｕ⁃ｆａｎｇ ，　 ＳＨＩ Ｄｅ⁃ｓｈｕｎ （１．ＳｔａｔｅＫｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒ Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎａｎｄ Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆ ＳｕｂｔｒｏｐｉｃａｌＡｇｒｏ⁃ｂｉｏｒｅｓｏｕｒｃｅｓ，Ｇｕａｎｇｘｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ５３０００５，Ｃｈｉｎａ； ２．ＧｕａｎｇｘｉＢｕｆｆａ⁃ ｌｏ ＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙ ｏｆ ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ，Ｎａｎｎｉｎｇ ５３０００１，Ｃｈｉｎａ； ３．ＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＲｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｒｅ，ＧｕａｎｇｘｉＭｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉ⁃ ｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ ５３０００１，Ｃｈｉｎａ） 　 　 Ａｂｓｔｒａｃｔ：　 Ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐａｔｔｅｒｎ ｏｆ