课件：第六章生物化学制药.ppt

提取方法－－有机溶液提取 注意事项： ?1. pH值 酸性物质在酸性条件下萃取； 碱性物质在碱性条件下萃取； 氨基酸等两性电解质，则采用在等电点进行提取。 2.盐析 在提取液中加入适量中性盐，促使生化物质转入有机相，从而提高萃取率。并且，盐析作用能减少有机溶剂在水中的溶解度，使提取液中的水分含量减少。 提取方法－－有机溶液提取 注意事项： 3.温度 室温或低温下操作 4.乳化 乳化层出现使有机相与水相分层困难。 消除乳化的方法:过滤、离心、轻轻搅动、改变两相的比例、加热、加电解质（NaCl, NaOH, HCl）、加吸附剂（CaCO3）。 提取方法－－有机溶液提取 注意事项： 液-液萃取时，溶剂的选择： ????具有较高选择性，即K值较大。 ????在萃取后，溶质与溶剂容易分离与回收。 ???两种溶剂的密度相差较大，以减少乳化作用。 ????无毒，不易燃烧，价廉。 生物活性物质的浓缩 浓缩是从低浓度的溶液除去水或溶剂，使之变为高浓度的溶液的过程。 1.? 盐析浓缩 添加中性盐，使蛋白质从稀溶液中沉淀出来 生物活性物质的浓缩 2.??有机溶剂沉淀浓缩 在生物大分子的水溶液中，逐渐加入乙醇、丙酮等有机溶剂，使生化物质的溶解度明显降低，从溶液中沉淀出来。 优点：溶剂易于回收，样品不必透析除盐。 注意：低温操作下，对大多数生物大分子较为稳定，但对某些蛋白质或酶，易引起变性失活 生物活性物质的浓缩 3.? 葡聚糖凝胶(Sephadex)浓缩（吸附法） 方法：将干葡聚糖凝胶G25或吸水棒按1：5加入到水抽提液中，缓缓搅拌30分钟，G25吸水膨胀，抽提液体积可缩小三倍左右。 注意：当吸水棒对有效成分吸附力强或吸水后对有效成分的性质有影响时，该法不宜采用。 生物活性物质的浓缩 4.? 透析浓缩法 方法：将待浓缩液放入透析袋内，放在吸水力强的聚乙二醇（简称PEG）或甘油中，袋内的水分很快被袋外的PEG或甘油所吸收。 优点：在短时间内可以浓缩几十倍至上百倍。 注意：搅拌条件下进行。 生物活性物质的浓缩 5.? 超滤浓缩 把抽提液装入超滤装置，在空气或氦气（5.05×105 Pa）压力下，使小分子物质（包括水分）通过超滤膜，大分子物质留在膜内。不同型号的超滤膜可以截留不同分子量的生物大分子。 生物活性物质的浓缩 6.? 真空减压蒸发 使蒸发器内形成一定的真空度，将溶液的沸点降低，进行沸腾操作，由于溶液沸点降低，能防止或减少物料的分解。 生物活性物质的浓缩 7.? 薄膜蒸发 液体形成薄膜而蒸发时，具有极大的表面，热的传播快而均匀，没有液体静压的影响，能够较好地防止物料的过热现象，物料总的受热时间也有所缩短，而且能连续进行操作。 干燥 概念：干燥是使物质从固体或半固体状经除去存在的水分或它种溶剂，从而获得干燥物品的过程。 目的：1.提高药物或药剂的稳定性，以利保 存与运输； 2.使药物或药剂有一定的规格标准； 3.便于进一步处理。 干燥 水分在干燥物料中的三种情况： 1. 表面水，容易汽化除去； 2. 毛细管中的水，由于毛细管壁的作用，较难除去； 3. 细胞内的水，要扩散到膜外才能除去。 由于后二种情况的存在，故干燥应缓慢进行 生物药物的常用干燥方法 （一）减压干燥，亦称真空干燥， 是在密闭容器中抽去空气后进行干燥的方法。 优点：温度较低，产品疏松，易碎，减少空气的影响。 效果：决定于真空度的大小、被干燥物的堆集厚度。 生物药物的常用干燥方法 （二）喷雾干燥 方法：将待干燥的物料先浓缩成一定浓度的液体，液体在与热空气接触过程中，水分迅速汽化，使产品得到干燥。 优点：缩短受热时间，产品为粉状 生物药物的常用干燥方法 （三）冷冻干燥 方法：将需要干燥的药物溶液预先冻结成固体，然后在低温低压条件下从冻结状态不经液态而直接升华除去水分的一种干燥方法。 优点：1.避免药物因高热而分解变质； 2.产品质地疏松； ???? 3.含水量低； 4.产品中的微粉物质少； 5.产品剂量准确，外观优良。 生物制药中分离、制备方法的特点 1.??生物材料组成复杂； 2.??含量极微： 3.???活性成分离开生物体后，易变性，破坏； 4.???分离几乎都在溶液中进行； 5.? 分离多采用温和的“多阶式”方式进行，即“逐级分离”。操作时间长，手续繁琐。 生物产品最后均一性的评估，要采用多