课件：第二章糖和苷类化合物化合物.ppt

（三）苷键的裂解 苷键具有缩醛结构，在稀酸或酶作用下可发生断裂、水解成苷元和糖。 研究苷类的化学结构，必须了解苷元结构、糖的组成、糖和糖的连接方式，以及苷元和糖的连接方式等。 苷键的断裂是研究苷类的组成和结构的重要方法。通过苷键的裂解反应可以了解苷元结构、糖的种类和组成，确定苷元与糖、糖与糖之间的连接方式。裂解的方法主要有：酸水解、碱水解、酶水解和氧化开裂。 1. 酸催化水解反应 苷键属于缩醛结构，易为稀酸催化水解。 水解反应是苷原子先质子化，然后断键生成阳碳离子或半椅式的中间体，中间体再与水结合成糖。 反应机制表明，苷原子的碱度，亦即苷原子上的电子密度，以及它的空间环境，对水解难易有很大关系。 N原子碱性最强，最易质子化。而碳上无共用电子时，几乎无碱性，最难质子化，因此N、O、S、C四种苷类N苷最易水解，而C苷最难水解。 酸水解的规律： 酸水解从易到难顺序为： N O S C 2.乙酰解反应 常用试剂：醋酐 + 酸 常用酸：H2SO4、HClO4、CF3COOH或Lewis酸（ZnCl2、BF3）等。 反应条件：一般是在室温放置数天。 反应机理：与酸催化水解相似，以CH3CO+（即乙酰基，Ac）为进攻基团。 用途 ⑴ 酰化可以保护苷元上的-OH，使苷元增加亲脂性，可用于提纯和鉴定。 ⑵ 乙酰解法可以开裂一部分苷键而保留另一部分苷键。 3.碱催化水解和β消除反应 一般苷键对稀碱是稳定的，所以应用很少，但某些特殊的苷如：酯苷、酚苷、烯醇苷、β-吸电子基取代的苷——易为碱水解。 4.酶催化水解反应 对难以水解或不稳定的苷应用酸水解法会使苷元发生脱水，异构化等反应，得不到真正的苷元，用酶水解苷键条件温和，不会破坏结构，同时酶的专属性高，选择性地催化水解某一构型的苷，还可提供更多的结构信息。 5.氧化开裂法（Smith降解法） 可得到原苷元。（除酶解外，其它方法可能得到的是次级苷元） 试剂：过碘酸（HIO4）、四氢硼钠、稀酸 以上简要介绍了主要苷键的水解方法，对于一些特殊的苷键，要采取一些特殊的水解方法。有些苷键极不稳定，在较弱的酸性或在水或稀醇液中稍长时间加热即能水解。因此，在保存苷时，要注意环境，防止水解。 四、糖和苷的提取分离 （一）提取 主要为溶剂法——水、稀醇（单糖、低聚糖、多糖） 糖类的提取可根据它们对乙醇和水的溶解度不同，而采用冷热水、冷热稀醇等条件。 苷类分子的极性随着糖基的增多而增大。可根据其极性大小，来选择相适应的溶剂。 由于植物体内有酶共存，必须采用适当的破坏或抑制酶的方法，才能提制出原存形式的糖和苷类。 方法： 采集新鲜材料 ——迅速加热干燥——冷冻保存等。 （二）分 离 1．活性炭柱色谱 ⑴ 概述 用途——分离水溶性物质效果较好，如：氨基酸、糖类及某些苷类。 特点——对于活性炭柱色谱来说： ①样品上柱量大，分离效果较好，适合大量制备； ②来源容易，价格廉； ③缺点：无测定其吸附力级别的理想方法。 分类： ①粉末状活性炭——颗粒细，总表面积大，吸附力及吸附量大。 ②颗粒状活性炭——颗粒较上者大，吸附力及吸附量也较上者次之。 ③绵纶-活性炭——以锦纶为粘合剂，将粉末状活性炭制成颗粒，吸附力最弱。 ⑵活性炭对物质的吸附规律 活性炭因为是非极性吸附剂，故与硅胶、氧化铝相反，对非极性物质具有较强的亲和能力，在水中对该类物质表现出强的吸附能力。溶剂极性降低，则活性炭对该类物质的吸附能力也随之降低。 活性炭在水溶液中的吸附力最强，在有机溶剂中吸附力较弱。 吸附规律： ①对极性基团（如-COOH、-NH2、-OH等）多的化合物吸附力大于极性基团少的化合物。（指分子量相当的两个化合物的比较） ②对芳香族化合物吸附力大于脂肪族化合物。（极性基团相同） ③对分子量大的化合物吸附力大于分子量小的化合物，即：多糖 单糖。 对于糖的吸附力：多糖 低聚糖 单糖 ⑶活性炭的预处理 一般预处理：活性炭加热150℃，4~5小时，除去大多数被吸附的气体。 严格预处理： ①0.2mol/L枸橼酸缓冲液洗涤后用蒸馏水反复洗 ②2~3mol/L HCl煮沸几次——后用蒸馏水反复洗 目的——除去混杂的金属离子，如：Fe+++、Ca++、Na+等，使活力增强。 ⑷ 柱色谱 ①装柱： 活性炭 + 蒸馏水 →（浸泡1小时）→搅拌（排除气泡） 活性炭/H2O → 倒入柱中 （若流速慢，则需与硅藻土1:1混合后，再用蒸馏水调成糊状装柱。） ②上样： 样品/H2O浓度——25~50%（可适当增加或减少，如为10%浓度）；上样量适情况而定，一般1克糖用100克活性炭。 ③洗脱： 洗脱顺