三聚氰胺分析检测方法研究进展【文献综述】.doc

文献综述 应用化学 三聚氰胺分析检测方法研究进展 2008年中国婴幼儿毒奶粉事件引起世界各国高度关注,在毒奶粉中检测发现了化工原料三聚氰胺,然而在此之前,美国也曾报道过数以千计的猫和狗因喂食含三聚氰胺的宠物饲料而致病或死亡。三聚氰胺(2,4,6-三氨基-1, 3, 5-三嗪)最早由德国化学家Justus von Liebig于1834年合成。现代工艺多采用尿素合成的三聚氰胺树脂常常被用于生产制作食品包装或餐具,因此食品中的三聚氰胺常常被认为是以三聚氰胺树脂为原材料食品包装或餐具中三聚氰胺迁移所致,也有认为三聚氰胺可能是杀虫剂灭蝇胺的代谢产物沿食物链富集进入植物或动物源食物所致。三聚氰胺生产过程和细菌代谢过程均可能产生副产物三聚氰酸(2,4,6-三羟基-1,3,5-三嗪)。三聚氰酸可以用作消毒剂,特别是在水处理过程中被广泛应用。慢性高剂量摄入三聚氰胺或三聚氰酸时会诱发肾脏病理学,而且三聚氰胺和三聚氰酸接触后可以通过氢键表现出极强的亲和力而形成轮辐状的难溶物―三聚氰胺-三聚氰酸复合物，该复合物很容易在动物肾脏中沉积,从而引起动物肾脏功能衰竭甚至导致死亡。 这几年对三聚氰胺分析检测的方法有： 液相色谱及串联检测器法：该方法主要使用紫外检测器(UV)和二极管阵列检测器(DAD)。前处理一般都是采用三氯乙酸-乙腈提取,过滤,过柱,洗脱。然后采用乙腈/水或缓冲盐的水溶液(v/v = 95∶5～80∶20)为流动相, 236nm (UV) 或240nm(DAD)为检测波长,室温下进样分析。由于三聚氰胺和三聚氰酸的紫外吸收波段均低于250nm,故色谱条件的变化以及样品的前处理过程,都将会产生定量的误差。 2.气相色谱串联质谱法：采用乙腈水或三氯乙酸浸提,加入乙酸锌或乙酸铅沉淀蛋白,超声后离心,取上层清液净化衍生,最终进行气相色谱-质谱进行测定。 3.毛细管电泳技术：目前普遍采用的方法是毛细管区带电泳-二极管阵列检测器来测定三聚氰胺。这种方法是利用三聚氰胺的强极性在简单的毛细管电泳模式中来实现三聚氰胺和干扰物的基线分离,并利用三聚氰胺极好的紫外吸收来进行测定,定量检测限在0.05mg/kg。 4.光谱法： (1)拉曼光谱法：将三聚氰胺提取液滴加到底物上,蒸发有机溶剂, 用拉曼光谱检测。在682cm-1和989cm-1处有位移,而682cm-1处与浓度有关。 (2)红外光谱法：采用近红外和中红外光谱法(衰减全反射傅立叶红外光谱FTIR2ATR 和漫反射傅立叶红外光谱DR IFT)来检测和定量分析婴幼儿配方奶粉中的三聚氰胺。通过对光谱数据和三聚氰胺浓度的最小二乘法拟合, R2 大于0.99。据此可以分析添加有1ppm三聚氰胺的奶粉。这种方法无需或只需少量样品前处理,缩短了检验时间,可在5min内完成检测。 (3)核磁共振法：采用400Hz下1H的核磁共振(NMR)模式,可以分析出受三聚氰胺污染的奶粉,通过图谱的叠加,亦可以作为定量手段。在研究受三聚氰胺污染的配方奶粉和蛋糕时, NMR可以获得与采用固相萃取液质分析同样的结果。 5.化学发光法：利用三聚氰胺可以与溶液中的肌红蛋白反应形成一种复合体,可以强烈地抑制鲁米诺与肌红蛋白反应产生的化学光的强度。化学发光强度的降低值与三聚氰胺的浓度在10pg/mL～50ng/mL范围内成正比线性关系,检测限达3pg/mL。 6.纳米粒子颜色法：三聚氰胺和三聚氰酸可以通过NH2O和NH2N两种氢键形式进行分子组装从而形成稳定的复合体(三聚氰胺和三聚氰酸的比例为1∶3) 。而在此过程中,三聚氰胺起决定作用。如果将三聚氰酸衍生,与具有极好光学特征的贵金属纳米颗粒形成稳定的复合体,加入三聚氰胺以后,三聚氰胺与三聚氰酸的结合,会改变纳米颗粒的光学特征,而这一特征变化可以从颜色上表现出来。 7.酶标仪检测法：利用萃取液通过均质及振荡的方式提取样品中的三聚氰胺进行免疫测定. 先将三聚氰胺酶标记物,样品萃取物及标准样加入到已经包被有三聚氰胺抗体的微孔中开始反应. 在30 min 的孵育过程中,样品萃取物中的三聚氰胺与三聚氰胺酶标记物竞争结合微孔中的三聚氰胺抗体,孵育30 min 后洗掉小孔中所有没有结合的三聚氰胺及三聚氰胺酶标记物. 在配制的洗液清洗结束后,每孔中加入清澈的底物溶液,结合的酶标记物将无色的底物转化为蓝色的物质. 孵育30 min 后加入终止液(盐酸) ,终止底物反应,在450 nm 波长处检测吸光度值,根据各孔颜色深浅进行数据读取,依据标准的吸光度值得出样品中三聚氰胺的的浓度值. 随着对三聚氰胺检测要求的不断提升,检测手段不断推陈出新,快速、便捷的检测技术不断涌现。食品中的三聚氰胺经过提取净化后可以采用色谱法、质谱法、光谱法和毛细管电泳法等现代仪器手段进行分析,也可以直接采用酶联免疫试剂盒法分析。理想的分析技术应