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- PAGE I -
本科毕业设计
（20_ _届）
增强型绿色荧光蛋白基因在大肠杆菌中的表达
所在学院
专业班级 生物技术
学生姓名 学号
指导教师 职称
完成日期 年 月
PAGE 1
目 录
TOC \o 1-3 \h \z \u HYPERLINK \l _Toc291851574 摘要 PAGEREF _Toc291851574 \h 1
HYPERLINK \l _Toc291851575 ABSTRACT PAGEREF _Toc291851575 \h 2
HYPERLINK \l _Toc291851576 引 言 PAGEREF _Toc291851576 \h 3
HYPERLINK \l _Toc291851577 1 材料与方法 PAGEREF _Toc291851577 \h 5
HYPERLINK \l _Toc291851578 1.1材料 PAGEREF _Toc291851578 \h 5
HYPERLINK \l _Toc291851579 1.1.1 菌株与质粒 PAGEREF _Toc291851579 \h 5
HYPERLINK \l _Toc291851580 1.1.2 工具酶及试剂 PAGEREF _Toc291851580 \h 5
HYPERLINK \l _Toc291851581 1.1.3 培养基 PAGEREF _Toc291851581 \h 5
HYPERLINK \l _Toc291851582 1.2方法 PAGEREF _Toc291851582 \h 5
HYPERLINK \l _Toc291851583 1.2.1 引物设计及合成 PAGEREF _Toc291851583 \h 5
HYPERLINK \l _Toc291851584 1.2.2 目的基因EGFP编码序列的克隆 PAGEREF _Toc291851584 \h 5
HYPERLINK \l _Toc291851585 1.2.3 PCR扩增产物的鉴定 PAGEREF _Toc291851585 \h 6
HYPERLINK \l _Toc291851586 1.2.4 目的片段回收 PAGEREF _Toc291851586 \h 6
HYPERLINK \l _Toc291851587 1.2.5 连接 PAGEREF _Toc291851587 \h 6
HYPERLINK \l _Toc291851588 1.2.6 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 PAGEREF _Toc291851588 \h 6
HYPERLINK \l _Toc291851589 1.2.7 转化 PAGEREF _Toc291851589 \h 7
HYPERLINK \l _Toc291851590 1.2.8 阳性克隆的筛选与鉴定 PAGEREF _Toc291851590 \h 7
HYPERLINK \l _Toc291851591 1.2.9 pMD19-EGFP质粒的抽提 PAGEREF _Toc291851591 \h 8
HYPERLINK \l _Toc291851592 1.2.10 重组质粒pET-28a-EGFP的构建及鉴定 PAGEREF _Toc291851592 \h 8
HYPERLINK \l _Toc291851593 1.2.11 转EGFP基因大肠杆菌的获得及原核表达条件的研究 PAGEREF _Toc291851593 \h 10
HYPERLINK \l _Toc291851594 2 结果与分析 PAGEREF _Toc291851594 \h 11
HYPERLINK \l _Toc291851595 2.1 目的基因EGFP编码片段的克隆 PAGEREF _Toc291851595 \h 11
HYPERLINK \l _Toc291851596 2.2 pMD19-EGFP质粒的构建和鉴定 PAGEREF _Toc291851596 \h 11
HYPERLINK \l _Toc291851597 2.3 重组质粒pET-28a-EGFP的构建和鉴定 PAGEREF _Toc291851597 \h 12
HYPERLINK \l _Toc291851598 2.4 转EGFP基因的大肠杆菌原核表达条件的
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