生化实验复习.docxVIP

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  • 2019-04-05 发布于广东
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—、离心技术 概念:根据物质的质量、沉降系数及浮力因素等不同,应用高速旋转产生强大的离心力,使物质分离、浓 缩、提纯的方法称为离心(centrifugation)技术。 离心的基本术语 离心力(F):在一定角速度下作圆周运动的任何物体都受到一个向外的离心力。F=co2r (3是旋转角速度,以弧度/秒为单位;r是离心转子的半径,以cm为单位) 相对离心力(RCF):离心力转化为重力加速度(g)的倍数。RCF= o2r/g= (1.119X10-5) n2r n为 转子每分钟的转数(rpm) 一般情况下,低速离心时常以转速“rpm”来表示,髙速离心时则以“g”表示。 沉降系数(S):颗粒在单位离心力作用下粒子移动的速度。 S的物理意义是颗粒在离心力作用下从静止状态到达等速运动所经过的吋间,单位为秒。S在实际应用 屮常在10-13秒左右,即10-13S为IS o文献屮常用沉降系数以描述某些生物大分子或亚细胞器大小。 离心机分类 普通离心机:最大转速6000 rpm左右,分离形式是固液沉降分离,转子有角式和外摆式,其转速不 能严格控制,通常不带冷冻系统,于室温下操作,用于收集易沉降的大颗粒物质,如红血球、酵母细胞等。 高速冷冻离心机:最大转速为20000?25000 rpm,分离形式是固液沉降分离,一般都有制冷系统, 通常用于微生物菌体、细胞碎片、大细胞器、硫镀沉淀和免疫沉淀物等的分离纯

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