还原型谷胱甘肽对高糖环境中人肾小管上皮细胞的保护作用研究-内分泌学专业论文.docxVIP

ifilU!谷111;.甘It对商糖环槐中人精小臂上皮细胞的保护做研究 中文摘要 还原型谷脱甘肤对高糖环境中人肾小管上皮 细胞的保护作用研究 中文摘要 目的 观察高糖对人肾小管上皮细胞 (HK-2 细胞)产生活性氛和核因子 幽幽(N孔Jd3)、骨桥蛋白 (OPN)的影响，探讨其与糖尿病肾病氧化应激机制的关系，并 应用还原型谷脱甘肤进行干预，以探讨该药治疗糖尿病肾病的作用及可能的机制。 方法 四甲慕偶氮峻盐仙Wη比色法观察不同浓度的还原型谷脱甘肤作用 48 小 时对HK.-2 细胞增殖的影响，确定合适的还原型谷脱甘肤实验浓度.将体外培养的人 储小管上皮细胞分为低糖对照组例)、高糖组仔 9、高糖+GSH(lmmo lJL)组、高糖 +GSH(5mmollL)组及高糖+GSH(1伽nmolJL)组1i组.培养 24h、48h 及 72h 后，用分光 光度比色法测定上清液超氧化物歧化酶 (SOD)活性和两二酸仙IDA)含量，用 RT-PCR 测定细胞内 NF-Jd3mRNA 的变化，及用酶联免疫吸附法测定上消液中 OPN 的含量. 并于培养 6h 后，用 DNA 琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。采用单因素方辈辈分析 (One-Way ANOVA Test)比较各组数据之间的装异. 结果 1 高糖组 SOD 活力显著低于正常对照组 (P啡.01)，三组浓度的还原型谷脱 甘肤均可增加 SOD 活力。0.05); 高糖组 MDA 含最明藏高于正常对照组(P 0.01)， 二三组浓度的还原型谷脱甘肤均可减少 MDA 含量是(pO .OI)，且均是剂量依赖伎.2 NF-lCBmRNA 的表达与 MDA 相似，高糖组明显高于正常组(Po .OI). 井里时间依赖 性，高糖培养组同时加入还原裂谷脱甘肤， NF-峭的商表达受到抑制(P0.05) ，J主抑 制作用随还原型谷脱甘放浓度的增加而增强，是剂最依赖关系. 3 在高糖组HK.-2 细 胞上清液中 OPN 含最明显高于正常组 σ0.01)，三组浓度的还原型谷脱甘肤均可减少 OPN 褒达(P0.01). 4 SOD 与 MDA、NF-Jd3及 OPN 均存在着负相关关系. MDA、 NF-lCB及 OPN 各因子问均存在着正相关关系，提示以上因子均参与丁商糖对HK. -2 细胞的损伤过程，可能相互之间具有协同作用. 5 商糖可造成肾小智上皮细胞凋亡， 使用还原 谷肮甘肤可明显抑制高糖所致的肾小管细胞凋亡. 还原 岱腕甘放对高糖环缝中人肾小管上皮细胞的保护性研究 中文摘要 结论 1 高糖能够剌激 E议.-2 细胞氧自由基的产生以及 NF-1CB及 OPN 的表达;2 还原裂谷脱甘肤抑制了高糖环境中 HK-2 细胞氧自由基的产生以及 NF-1CB及 OPN 的 高表达，从而可能抑制细胞外基质的合成和肾问质纤维化。 3 还原型谷脱甘肤能抑制 衡糖环境中 HK-2 细胞的调亡. 关键诩还原裂谷脱甘肤:高糖:人肾小智上皮细胞$活性氧 作者z 肖曼 指导李老师:宽宙样 H 还lut谷It甘欣对商糖环镜中人肾小管上皮细胞的保护做研究 笑文摘要害 Protec甜ve efJec制。f reduced g1utathione on the human renal tubular epithelial cells cul阳red in high g1ucose ABSTRACT 。创甜ve: To investigate the effect of 1妓院g1ucose on the production of the reactive oxygen species (ROS)，nuclear factor、kappa B 例F-Jd3) and ostωpontin (OPN) in the hurnan renal 阳bular epithelíal cells (HK剖， the relation with oxidative stress in diabetic nephropathy and the production of ROS，NF-Jd3 and OPN. We also 就udied the effect of reduced g1utathione on oxidative stress in dia加世c nephropathy in vitro. Methoω: HK-2 cells were cultured with differentω，ncentrations of GSH