乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes对内皮细胞增殖的影响及MAPK.PDF

　 军 杂 2012年11月1 日　第37卷　第11期 884 解放 医学 志　 乳腺癌MDA-MB-231细胞源Exosomes对内皮细胞增殖的影响 及MAPK/ERK和PI3K/Akt信号通路的作用 隆霜，沈宜，谢莹珊，范维珂，姜蓉，陈黎 [摘要]　目的　研究人乳腺癌MDA-MB-231 细胞源Exosomes 对人脐静脉内皮细胞(HUVECs) 的促增殖作用，并 初步探讨MAPK/ERK 和PI3K/Akt信号转导通路在此过程中的作用。方法　低温超速离心及密度梯度离心法提取乳腺 癌MDA-MB-231 细胞源Exosomes 。采用MTT 法分别检测50 、100、200 、400 μg/ml Exosomes对HUVECs促增殖作用的 影响，流式细胞仪测定200 μg/ml Exosomes对HUVECs 细胞周期的影响，Western blotting 检测200 μg/ml Exosomes诱导 下HUVECs 细胞内细胞外调节蛋白激酶(ERK)和蛋白激酶B(Akt)蛋白的表达水平。结果　乳腺癌MDA-MB-231 细胞源 Exosomes 可促进HUVECs细胞增殖，且呈时间和剂量依赖性。200 μg /ml Exosomes作用HUVECs细胞24h后，S期细胞比 例(27.8% ±3.37%)较对照组(15.34% ±0.71%)增加(P 0.05) ，G 1/S期细胞比例(2.22% ±0.37%)与对照组(4.67% ±0.47%) 比较下降(P 0.05) 。Western blotting 结果显示，200 μg/ml Exosomes作用HUVECs 细胞24 、48 、72h后，磷酸化ERK 表达(0.3378 ±0.0415 ，0.4967 ±0.0511 ，0.9205 ±0.0462) 与磷酸化Akt 蛋白表达(0.4091 ±0.0361 ，0.5484 ±0.0382 ， 0.7496 ±0.0481)与对照组(磷酸化ERK 0.1836 ±0.0324 ，磷酸化Akt 0.2582 ±0.0215)相比有所增加(P 0.05) 。结论　乳腺 癌MDA-MB-231 细胞源Exosomes 能促进HUVECs 的增殖，其机制可能与细胞周期改变，以及MAPK/ERK 和PI3K/Akt信号 通路的持续活化有关。 [关键词]　Exosomes ；胞外信号调节激酶；蛋白激酶B ；增殖；乳腺癌 [中图分类号]　R730.23 [文献标识码]　A [文章编号]　0577-7402(2012)11-0884-05 Effects of exosomes derived from MDA-MB-231 on proliferation of endothelial cells and the role of MAPK/ERK and PI3K/Akt pathways * LONG Shuang, SHEN Yi , XIE Ying-shan, FAN Wei-ke, JIANG Rong, CHEN Li Department of Pathophysiology, Institute of Stem Cell and Tissue E ngineering , College of B asic M edicine, Chongqing M edical University, Chongqing 400016, China * Corresponding author, E-mail: shenyicq@163.com [Abstract]　Objective　To investigate the effects of exosomes derived from breast cancer cell line MDA-MB-231 on proliferation of human umbilical cord vein endothelial cells (HUVECs), and evaluate the role of MAPK/ERK and PI3K/Akt signal transduction pathway during the process. Methods　Exosomes were der