人B7H4启动子荧光素酶报告基因载体的构建及活性分析-现代免疫学.PDF

《 》 现代免疫学 年第 卷第 期 · · ２０１８ ３８ １ ９ １ 人 ７Ｈ４启动子荧光素酶报告基因载体的构建及活性分析 Ｂ ， ， ， １ ２ １ ２ ２ １ ２ 林雨虹 ，林怡婷 ，周琳琳 ，张秋玉 （ ， ； ， ） 福建医科大学 基础医学院免疫学系 福州 福建医科大学 免疫治疗研究所 福州 ． ３５０１０８ ２． ３５０１０８ １ 　 　 　 　 摘 ： ， ， 要 为构建人Ｂ 基因启动子荧光素酶报告基因载体 以人外周血单个核细胞基因组Ｄ 为模板 扩增 条不 ７Ｈ４ ＮＡ ＰＣＲ ３ ， ； ， 同长度人 启动子序列 并插入 荧光素酶报告基因载体中 待测序验证后 将 个重组质粒及 内 ７Ｈ４ ＰＧＬ３ ａｓｉｃ ３ ＲＬ Ｋ Ｂ Ｂ Ｔ － ｐ － 参 ， 。 质粒分别共转染 细胞 采用双荧光素酶报告基因系统检测其启动子活性 测序结果显示构建的 个人 ＨＥＫ ９３Ｔ ３ ７Ｈ４ －２ Ｂ ； ， ， 基因启动子重组载体序列正确 重组载体转染 ＨＥＫ ９３Ｔ细胞 经双荧光素酶报告基因检测确定重组载体有启动子活性 －２ 其中 。 Ｐ 重组载体的转录活性较高 本研究成功构建了 条含不同长度的 启动子序列的荧光素酶报 ＧＬ３ ７Ｈ４ ．５ｋｂ ３ ７Ｈ４ －ｈＢ －０ Ｂ 告 ， 启动子的转录调控元件及肿瘤微环境中调控 表 基因系统 为后续分析人Ｂ