贵州苗药艾纳香DNA条形码的鉴定研究-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

魏妮娜遵 魏妮娜 遵义医学院硕士学位论文 万方数据 万方数据 贵州苗药艾纳香 DNA 条形码的鉴定研究 中文摘要 目的：应用 DNA 条形码对贵州苗药艾纳香及其混伪品进行鉴定，以确定 DNA 条形 码技术在中药鉴定中的有效性。 方法：分别提取艾纳香及其混伪品的 DNA，对其 DNA 中 ITS、psbA-trnH、matK、 rbcL 序列进行 PCR 扩增和测序，应用 CodonCode Aligner V3.0 对测序峰图进行校对 拼接，去除低质量序列及引物区，获得靶序列。应用 MEGA5.0 软件计算物种种内种 间 Kimura2-parameter (K2P)遗传距离；采用相似性搜索法、最近距离法、构建 NJ 系 统发育树等方法对候选序列进行鉴定分析。 结果：获得苗药艾纳香的ITS、psbA-trnH完整序列及rbcL、matK部分序列；苗药艾 纳香ITS、ITS2、psbA-trnH三个序列的种间最小K2P遗传距离远大于种内最大K2P遗传 距离；基于三个序列构建的NJ系统发育树中可看出，艾纳香与其近缘种单独聚为一枝， 表现出单系性，能明显与伪品大叶紫珠分开。 结论：相对于rbcL、matK、psbA-trnH序列，ITS2序列最适合用于鉴别艾纳香及其近 缘种和伪品，为有效鉴定艾纳香提供了科学依据。 关键词：艾纳香；ITS 序列；ITS2 序列；rbcL 序列；matK 序