贵农6号小麦抗白粉病基因的分子标记-植物病理学专业论文.docxVIP

贵州大学硕士论文贵农 贵州大学硕士论文 贵农 6 号小麦抗白粉病基因分子标记 PAGE PAGE 1 摘要 小麦种质贵农 6 号是用中燕 96-3（母本）与贵农 21（父本）为杂交亲本，从 F2 开始， 运用常规育种方法并结合分子标记辅助选择技术，严格按照矮秆、兼抗、优质、高产等标准 对杂种后代进行系统选育，经多代选育而成的新种质。本文运用 SCAR，SSR 技术，采用分 离群体分组分析法（Bulked Segregate Analysis，BSA），对小麦抗病种质贵农 6 号抗白粉病 基因进行分子标记，验证得出小麦贵农 6 号含有抗白粉病基因 Pm21，SCAR 筛选出 1 条与 抗白粉病基因紧密连锁的引物，并对抗病和感病群体进行了验证。 1、以感病品种藁 98143 与抗病种质贵农 6 号杂交，对杂交后代 242 个单株 F2 分离个体 和双亲，以小麦白粉病当前流行生理小种 315 号接种进行抗病性鉴定。结果其中的 183 个单 株表现抗病，59 个单株表现感病，卡方（χ2）测验表明，χ2 ＝0.033χ2 ＝3.841，说明 0 0.05，1 F2 群体的抗感分离比例符合 3R:1S，初步确定贵农 6 号白粉病抗性是由一对显性基因控制。 2、依据 BSA 方法建立抗病池和感病池，通过 SCAR 实验，引物 Pm21D,E 能在抗病亲 本贵农 6 号和抗病池中扩增出大小约为 1265bp 的标记带，而在感病亲本藁 98143 和感病池 中不能扩增出该标记带，经 3 次重复均能得出相同的结果。用 F2 分离群体进行单株分析， 结果抗病单株中均有此标记，感病单株均无此标记带。说明贵农 6 号含有抗白粉病基因 Pm21，Pm21 基因目前已被定位于 6VS 染色体上。 3、用特异引物 D-L,R 对贵农 6 号抗病亲本与藁 98143 感病亲本和抗病池感病池及杂交 后代的 F2 代抗感单株进行 SCAR 检测。结果在贵农 6 号和抗病池中都能扩增出 140bp 标记， 而在感病亲本和感病池中均缺乏该标记，用 F2 分离群体进行遗传连锁性分析，结果 F2 的 183 个抗病单株中有 179 个抗病单株有此标记，其余 4 个抗病单株和及 F2 的 59 个感病单株均无 此标记，经计算，标记与抗病基因间的遗传距离为 2.12±0.015cM，说明 D-L,R 的 SCAR 标 记与贵农 6 号抗白粉病基因紧密连锁，在杂交育种过程中易于伴随抗病基因遗传，因此可有 效利用该标记进行分子辅助选择。 4、以贵农 6 号×藁 98143 亲本组合及其 F2 代群体为材料，利用 6AS 上的 SSR 标记进 行抗白粉病基因的 SSR 标记筛选，结果所用引物只在感病材料有扩增产物，抗病材料无扩 增带。位于 6AL 上的 SSR 引物在抗感材料间都有扩增。 关键字：小麦；抗白粉病基因；SCAR；SSR；分子标记； 中图分类号： S512；S435.121 Abstract Powdery mildew caused by Erysiphe graminis DC is a severe wheat disease in China,which has become more and more serious recently. Guinong 6 is a new germplasm with resistance gene against powdery mildew in wheat.In this study, SCAR and SSR were used, Bulked Segregate Ananlysis (BSA) were employed to detect molecular markers linked to powdery mildew resistance gene in wheat germplasm Guinong 6. The main results were as following: By inoculating with Blumeria graminis DC.f.sp.tritici 315 which is the most popular race of wheat powdery mildew, the powdery mildew resistance test was performed for F2 242 variant plants from the hybrid of susceptible variety Gao98143 and resistance strain Guinong 6. 0The results showed that 183