含硒类球红细菌的优化培养及生理功能的研究-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

IV IV 含硒类球红细菌的优化培养及生理功能的研究 摘 要 本实验以光合细菌中的类球红细菌 1 号菌株(Rhodobacter Sphaeroides No.1)为研究对 象 分析了碳源 氮源和生长因子等因素对 1 号株生长的影响 实验表明 1 号株能利用 多种碳源 以乙酸钠为例 浓度在 3g/L 以下时 菌株生长随浓度增加而加快 浓度达到 5g/L 时 菌体生长滞留期延长 菌株对有机氮源 蛋白栋 和无机氮源 NH4Cl 均能利用 另 外 乙酸钠为碳源时 一定浓度的酵母膏对菌株生生长是必需的 综合对 1 号株生长影响 较大的四个因素 进行了正交实验 其最适培养基为 乙酸钠为 4g/L NH4CL 为 0.8g/L 蛋 白胨为 0.2g/L 及酵母膏为 0.8g/L 为了确定类球红细菌转硒培养的最佳条件 研究了无机硒的加入浓度 时间对菌体 生长和转硒效率的影响 实验表明无机硒的浓度低于 1 10-5mol/L 时 对类球红细菌的 生长基本没有影响 并能将 63.9%的无机硒转化为有机硒 转硒的最佳时间是在接种后 12 小时左右 此时转硒效率最高 实验还表明分批补料培养可以提高菌体浓度 在亚 硒酸钠浓度为 2 10-5mol/L 时 可使转硒效率由 42.3%提高到 68.01%, 使绝对量增加 38.8% 比较了含硒菌体与一般菌体灌喂小鼠对其全血谷胱甘肽过氧化物酶 GSH- Px 活 性和血清丙二醛MDA含量的影响 体内试验表明 用 5ml/kgbw 和 10ml/kgbw 剂量 的含硒类球红细菌灌养小鼠可以使其全血 GSH-Px 酶活性提高 20.9% 和 25.5%, 使其血 清丙二醛 MDA含量降低 21.0%和 23.2% 实验结果表明了含硒菌体提高体内抗脂 质过氧化能力的作用较一般菌体更为显著 免疫学实验分析表明 含硒光合细菌能有效增强小鼠腹腔吞噬细胞的功能 正常组 小鼠用类球红细菌不含硒灌胃后 吞噬百分率提高不多 免疫抑制组的小鼠用类球红细 菌不含硒灌胃后 吞噬百分率提高约61% 吞噬指数提高约59% 另外 含硒类球红细 菌能一定程度活化淋巴细胞 类球红细菌灌胃组不含硒与饮水组相比 刺激指数提高了 21% 含硒组提高了35%P0.05在免疫抑制处理后 不含硒组刺激指数提高了23% 而 含硒组提高了51%P0.05实验显示了含硒类球红细菌有较强的免疫调节活性 关键词 硒 类球红细菌 抗脂质过氧化 免疫调节 V V The Optimum Cultivation and Physiological Functions of Selenium-containing Rhodobacter sphaeroides Abstract Using Rhodobacter sphaeroides No.1 as experimental strain , we analyzed the effect of a variety factors including carbon sources, nitrogen sources and growth factor on the growth of No.1. The No.1 can make use of a series of organic carton sources. When the concentration of NaAC is less 3g/L, the growth rate of No.1 has a positive relativity with the level of NaAC. After the concentration reach 8g/L, the lag phase is comparatively longer. The No.1 strain can grown on both polypeptone or NH4Cl-containing media. And a certain concentration of yeast extract is necessary when NaAC is used as carbon source. With the orthogonal designed experiment of four factors , we determine an optimum medium which is most suitable for No.1 growth: NaAC concentration at 4g/L, NH4Cl at 0.8g/L, polypeptone at 0.2g/L and yeast extract at 0.8g/