- 1、本文档共65页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明
学位论文独创性声明
本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除 文中已经注明引用的内容外 ,本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究 做出重要贡献的个人和集体,均已在文中作了明确的说明并表示谢意。
研究生签名: 时间: 年 月 日
学位论文版权授权书
本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定,学校有权保留学位论文并向国家主 管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文用于赢利目的的少量复制并允许论 文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据进行检索。有权将学位论文的标题 和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。
研究生签名:
时间:
年
月
日
导师签名:
时间:
年
月
日
I
I
摘 要
棘球蚴病(Echinococcus hydatid disease)即包虫病(Hydatid disease),是制约新疆绵羊 产业发展的主要疾病之一,同时其又是一种人畜共患病,对牧民的身体健康也构成了严 重威胁。主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)是由许多紧密 连锁、高度多态的基因位点组成的染色体上的一个基因系统,因其高度的多态性和在抗 原递呈中的重要作用,成为疾病相关基因研究的热点之一,已证实人 MHC 的多态性与 多种疾病具有相关性。在绵羊 MHC 研究方面,本试验室即在前期研究中筛选出了哈萨 克绵羊细粒棘球蚴病抗性、非抗性相关的 MHC 基因单倍型,并进行了初步的验证。但 对此抗性相关 MHC 基因单倍型哈萨克绵羊个体抗包虫的分子作用机制尚不知晓。为此, 本试验在此前期研究的基础上,采用抑制性消减杂交技术构建了哈萨克绵羊 MHC 抗性、 非抗性个体,细粒棘球六钩蚴小肠侵染期小肠组织的消减文库,并对差异表达基因进行 了初步分析,为进一步揭示哈萨克绵羊 MHC 包虫病抗性相关基因单倍型个体抗包虫的 分子作用机制提供研究基础。结果如下:
1、依据试验室前期研究中,采用 PCR-RFLP 技术获得哈萨克绵羊细粒棘球蚴病抗 性、非抗性相关 MHC 基因单倍型的方法,对 250 只哈萨克绵羊进行了分析,筛选出了 细粒棘球蚴病抗性和非抗性相关 MHC 基因单倍型的哈萨克绵羊 14 只和 22 只。进一步 对筛选出来的绵羊个体进行了细粒棘球蚴抗体的 ELISA 检测和肝脏部位的 B 超探测, 选取 ELISA 检测结果为阴性同时 B 超探测肝脏部位无包囊的抗性和易感性个体各 3 只。 以每只绵羊饲喂约 5000 个成熟细粒棘球绦虫虫卵进行人工感染,建立了 MHC 包虫病 抗性、非抗性哈萨克绵羊细粒棘球蚴六钩蚴侵染期模型。
2、采用抑制性消极杂交技术建立了 MHC 包虫病抗性、非抗性哈萨克绵羊细粒棘 球蚴六钩蚴侵染期小肠组织的正反向消减文库。以管家基因 GAPDH 进行了消减效率的 检测,两个文库的消减效率均达到了 25 以上,提示所建文库的质量较好,能够用于后 续的进一步分析。
采用菌液 PCR 技术对正向(抗性相关组为 Tester)和反向(非抗性组为 Tester)消 减文库中的阳性克隆进行了分析验证,结果显示,插入片段大小均在 150bp-1000bp 之 间,符合实验预期。又分别从正反向文库中随机挑选了 57 个和 45 个的阳性克隆(单一 条带,且大小大于 150bp)进行了测序分析。分别获取了单一 EST 序列 43 个和 40 个。 通过 NCBI 数据库的 Blast 功能对所获 EST 序列进行了同源性分析。
采用实时定量 PCR 技术,对 3 个 EST 序列(IgM-VH、PLA2G2A 和 FTH1)在抗性相 关组和非抗性相关组哈萨克绵羊六钩蚴小肠侵染期小肠组织中的表达量进行了进一步 的分析和验证。结果显示 3 个 EST 序列在两组中存在着差异表达,确为差异表达的基 因。
关键词:抑制性消减杂交;包虫病;MHC;哈萨克绵羊;六钩蚴
I
I
II
II
Abstract
Echinococcosis (Hydatidosis) is one of the major diseases that restrict the development of sheep industry in xinjiang. It is also an amphixenosis, which poses a serious threat to the health of pastoralists. Major histocompatibility complex (MHC) is part of chromosomal region c
您可能关注的文档
- 哈电集团人才租赁公司组建与运营设计工商管理专业论文.docx
- 广州2014年登革热流行特征及气候、蚊媒对广州登革热发病的影响-流行病与卫生统计学专业论文.docx
- 含有WW结构域的氧化还原酶的基因在骨肉 瘤化疗中的作用-骨科学(骨肿瘤)专业论文.docx
- 冠心病秽浊痰阻证与纤溶活性、血脂的相关性研究-中医内科学专业论文.docx
- 观新“江姐”忆歌剧《江姐》的发展-音乐学专业论文.docx
- 贵州中烟工业公司卷烟品牌战略研究-工商管理专业论文.docx
- 硅胶固载离子液体的制备及其催化合成聚甲醛二甲醚性能的研究-化学工程与技术专业论文.docx
- 光子晶体光纤和波导的特性及其应用-超平坦色散,偏振束分裂和单向透射性-材料物理与化学专业论文.docx
- 关于两类非黎曼量Ξ-曲率和H-曲率的研究-应用数学专业论文.docx
- 含聚污水稀释聚合物溶液影响因素研究及处理工艺优选-环境工程专业论文.docx
- 携程产品营销经理岗面试题库参考答案和答题要点.docx
- 携程产品经理岗面试题库参考答案和答题要点.docx
- 携程供应链管理专员岗面试题库参考答案和答题要点.docx
- 携程交易数据分析师岗面试题库参考答案和答题要点.docx
- 携程公共关系专员岗面试题库参考答案和答题要点.docx
- 携程内部培训专员岗面试题库参考答案和答题要点.docx
- 福建省福州市2023-2024学年高二上学期期末测试英语试卷(含答案).pdf
- 携程人力资源专员岗面试题库参考答案和答题要点.docx
- 福建省三明市2023-2024学年高二上学期期末测试英语试卷(含答案).docx
- 福建省三明市2023-2024学年高二上学期期末测试英语试卷(含答案).pdf
文档评论(0)